实验指导(节录自：哈尔滨医科大学生理学(高职高专类)实验.pdfVIP

实验指导（节录自：哈尔滨医科大学生理学(高职高专类)实验讲义） 实验一 坐骨神经腓肠肌标本制备 [目的] 学会制备神经肌肉标本的方法 [原理] 蟾蜍或蛙的一些基本生命活与温血动物相近似，而且离体组织所需要的生活条 件比较简单，容易控制，所以可用蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察神经冲动、兴奋性、兴奋 过程及肌肉的收缩特点等等。 [用品]蛙或蟾蜍、蛙类实验用品。 [步骤] 1、破坏脑和脊髓取蟾蜍（或蛙）一只，用水冲活干净。用左手握住蟾蜍（背部朝上） 食指压住头部前端，使头前倾。可见头部背面正中线上有一凹陷处（即枕骨大孔所在部位）。 右手持探针尖在此处垂直刺入 1—2mm，再将探针放平，针尖转向头部，经枕骨大孔将探针 刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；而后将探针退出枕骨大孔，使针尖向后刺入椎管，捣毁脊 髓。如动物四肢松软，表明脑、脊髓已完全破坏。 2、切断脊柱 用左手捏住蛙腰部，右手持粗剪刀，在肩关节稍下方处将剪刀的一刃插入 脊柱前方，剪断脊柱。 3、剪除上半身及内脏右手用粗剪刀沿腹壁左右侧向后剪去，此时蛙体上半身和大部分 内脏便一同垂向下方）。在耻骨联合处将腹壁和脏器一并去掉，只保留双腿和与之相连的腹 后壁及脊柱，切勿切断。 4、去皮 左手捏住脊柱（不要触及神经），右手捏住其上的皮扶边缘，向下翻转剥掉全 部后肢的皮肤。将标本放在盛有任氏液的培养器中。 5、分离两腿 将手和用过的器械洗净后，捏住脊柱使背面朝上，使尾骨突出于背侧。平 放剪刀剪去尾骨（切勿损伤坐骨神经）。然后从耻骨联合中央脊柱正中线用粗剪刀剪开，使 左右两腿完全分开。将标本浸入盛有任氏液的培养皿中（在制备过程中应随时滴加任氏液湿 润标本）。 6、分离坐骨神经将标本用大头针固定于蛙板上，用玻璃分针将股骨背侧股二头肌和半 腰肌拉开，暴露并分离坐骨神经。用粗剪刀剪下一小段与坐骨神经相连的脊住，将此脊柱轻 轻提起，逐一剪去坐骨神经的分支。在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用刀将股骨刮干净， 然后在股骨中部剪断，去上段，保留与膝关节相连的一段股骨备用。 7、分离腓肠肌在踝关节处，将跟腱两侧组织剪开，分离并用线扎跟腱，保留一段线， 在结扎处的远端剪断跟腱。提线将跟腱提起，小心将腓肠肌分离出来，然后在膝关节处剪断 股骨，就制成了坐骨神经腓肠肌标本。用锌铜弓刺激坐骨神经，观察腓肠肌是否收缩。 [讨论]在本次实验中应注意哪些问题？ 实验二 肌肉收缩形式与刺激频率的关系 [ 目的]观察刺激频率与收缩波形的关系，了解强直收缩形成原因。 [原理]肌肉受到一个刺激后，发生一次收缩，称为单收缩。单收缩曲线分为潜伏期，收 缩期与舒张期。当给予连续刺激，如果刺激落在前一个收缩的舒张期，就会再次引起收缩出 现锯齿状的收缩曲线，称为不完全强直收缩。如刺激频率增加，新刺激落在前一个收缩的收 缩期，可出现强而持久的不弛缓的收缩，称为完全强直收缩。 [用品]蛙或蟾蜍，蛙类实验通用器械和用品、肌槽、生理微机记录仪。 [步骤] 一、实验准备 1、制备坐骨神经腓肠肌标本。 2 、将标本置于肌槽中，股骨断端置于槽侧壁的骨孔中，旋紧螺丝钉固定之，坐骨神经 放置在刺激电极上。将腓肠肌腱上的丝线系于张力换能器的着力点上，调节肌槽与张力换能 器之间的位置和距离，使丝线垂直，并令肌肉处于自然拉长的长度。 3、联接实验装置，信号由通道一输入，回路放大器D/A—1 或 D/A—2 输出刺激电极， D/A—1 或 D/A—2 幅度电位器顺时针方向调到最大（5V ）运行菜单所需要的有关实验管理 程序。在菜单条目中选择《骨骼肌单收缩和复合收缩》程序。 4 、运行程序后根据实验要求设置刺激器参数，并通过控制按钮控制程序流程。 设置参数：频率任定；刺激时间单收缩；刺激强度为 0、1V；脉冲宽度为0、3ms 。观察收 缩曲线。改变刺激器强度（0、1-—1、0V ），使肌肉产生最大收缩，适当调节扫描时间和 压力放大器增益，以得到满意的波形。 5、观察复合收缩和强直收缩。减慢扫描速度，程控刺激器刺激时间设为 0、5S，刺激 强度和脉宽度同前。以下同频率（1、2 、4 、8、16、32Hz ）刺激标本，每次刺激间隔时间 为 5S 。观察不完全及完且强直收缩波形，选取典型波形储存。 6、结果打印。