多聚酶链式反应扩增DNA片断教学用.pptVIP

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2019-10-16 发布于湖北
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多聚酶链式反应扩增DNA片断教学用.ppt

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多聚酶链式反应扩增DNA片断思考讨论： 1.DNA的基本组成单位 2.这些基本单位是如何连接成DNA分子的? 3.DNA分子结构有什么特点？ 4.DNA复制的过程 5.DNA复制的条件 ;㈠.DNA分子的结构;一个核苷酸上的磷酸基团上的“－OH”和另一个核苷酸分子的第3位碳原子上的羟基之间失去一分子水，形成磷酸二酯键，即在相邻的两个脱氧核苷酸的3’和5’碳原子之间形成磷酸二酯键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’、5’、磷酸二酯键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。通常将DNA的羟基“－OH”末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端;4.DNA分子的双螺旋结构;1;脱氧核苷酸长链;DNA的反向平行结构 ;3’HO;;1、 PCR（多聚酶链式反应）技术：是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。 2、原理：利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。;(二)PCR反应的过程（三步）;;靶序列;靶序列;靶序列;;4、PCR 循环的结果;⑴.PCR过程需要的引物不是RNA，而是人工合成的DNA单链，其长度通常为20－30个脱氧核苷酸;1、PCR仪;2、微量离心管;1.准备;将离心管放入PCR仪上，设置好PCR仪的循环程序。;㈠.理论上DNA扩增数目的计算;⑵.对照调零;光吸收;比色杯;四.课题延伸;五.实验小结