磁靶向给药系统——丝裂霉素C-聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米制剂的实验研究.docx

磁靶向给药系统—一丝裂霉素C．聚氰基闲烯酸正丁黼 磁靶向给药系统—一丝裂霉素C．聚氰基闲烯酸正丁黼 磁性缡米制剡的实验研究 博十生 任非 导师 陈建海教授 中文摘要 本研究选用聚氰基丙烯酸正’r酯作J,j载体$捧}，抗癌药物选择高效抗肿瘤 纯疗药物一一丝袋霉素C(Mitomycin C)，磁流俸为磁魏秘攀b阻毳纯聚合法 制备丝裂霉豢e聚氰基丙烯酸正J‘酯磁性纳米球(MMC．PBcA．硼帅S)。并 研究了MMC。PBCA-MNPS『1匀细胞毒性作用；体内分布与靶向性研究以及药效 学磺究。 论文的第二章，以NH3·t120为沉淀剂，化学共沉淀微乳液中的F护与F矿 离子以制各jf}!癸酸稳定的Fe304纳米粒子水基磁流体。考森了搅拌时间、水体 积、丙酮体移{与正癸酸量对形成Fe304水漶磁流体粒衽及其分布、多分散度与 稳定眭等的影响。露光了稿关光谱仪鞭8定了所褥磁流体的粒径及其分凌i落。在 综合以上结果的基硎止，我们设计并制备了若干『F癸酸包覆的Fb04水撼磁流 体。实验结聚表明：磁流体的数均粒径约为lO--20nm。测定了磁流体的饱和磁 纯强度，箕谯为：1．85kA·糠1。 提m了一种未见文献报道的制备双层表面活性剂稳定的Fe304水撼磁流体 的一步法。J衄用正癸酸作为表面活性剂，首次用一步法制得了双层正癸酸稳定 瓣Fe304东基磁滚体，震光予援关毙谱{义(PCS)、透黎电镶(TEM)弱JDM-3 型振动样品磁强计表征了制得的水基磁流体。分别制备了单层与双层正癸酸包 覆的Fe304磁粒子的固态样品，用Ill、TG、DTG、DSC(10．-600。C)及DSC (一10-80。C)考查了蕊穗固态榉晶的组成与性质。实验维粟表明：该磁流体放 置长达一年，来观察到褶分离发生。其稳定性可与二步法隶《备的双瑟j卜癸酸、 讯壬酸稳定的Fb04水螭磁流体相媲美。 谯第i章，旨次提出与建立r存pH=6．3—6．5条件下，片{乳化聚龠法制得 末见文献报道的PBCA磁性纳米球(PBCA-MNPS)的稳定胶体溶液。用光子 末见文献报道的PBCA磁性纳米球(PBCA-MNPS)的稳定胶体溶液。用光子 相关光游仪和透射电镜测定了磁性纳米球的粒径及其分布；紫外分光光度法测 定了礅眭纳米球中Fe的含量。给山载体浓度与稳定剂浓度对磁|生纳米球粒径 及其分布的影响。讨论了PBCA磁性纳米球稳定机理。用正交实验设计优选山 制备MMC—PBCA冉州PS稳定胶体溶液的最佳制各条件。用BH=6．3“．5条件 的乳化聚合法，制备了丝裂霉素c．聚氰基丙烯酸『F丁酯磁性纳米球 (MMc．PB(潍^oJI)S)的稳定的胶体溶液，将其放封六个月，未观察到有相 分离发生，粒径大小及其分布也无明显变化。埘光子相关光谱仪、紫外分光光 度法与JDM．3型振动样品磁强计对MMC-PBCA-MNPS进行了表征。数均粒 释为124．0 nffl，平均包封率(ER)为85．51％±o．74％，平均载药量(DL)为 8．61％±O．04％。实验结果表明：从热力学观点看，MMC．PBCA-MNPS胶体溶 液的稳定机构为焓稳定机构。 第四章研究了丝裂霉素C．聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米球 (MMC．PBCA-MNPS)、PBCA-MNPS和MF(磁流体)以及MMC对正常人肝 细胞株(L-02细胞)生长抑制作用的影响。采用MrT比色法研究了不同浓度 的MMC．PBCA-MNPS、PBCA-MNPS、MF与MMC对IAY2细胞生长抑制作 用的影响；用自动生化仪测定T-TL酸脱氢酶(Ⅱ)H)活性。并用流式细胞仪研 究了MMC-PBCA．MNPS、PBCA．MNPS与MMC对L-02细胞的凋Tl和细胞 周期的影响。MTr矛U LDH的结果是加入不I司浓度的MMC、MF、PBCA-MNPS、 MMC．PBCA-MNPS后，MMC、PBCA-MNPS、MMC．PBCA-MNPS均表现浓 度依赖性的细胞毒性作用，根据相对牛长率(RGR％)的数据， MMC-PBCA．MNPS，PBCA．MNPS，MF和MMC对I_,02细胞的毒性评分分 别为：1、1、0和4级。b02细胞株增殖抑制的顺序如下： MMCMMC-PBCA-MNPSPBCA-MNPSMF。流式细胞仪的研究结果表明 MMC．PBCA。MNPS、PBCA-MNPS与MMC对L-02细胞呈现出不同程度的增 碴抑制作用。 第五章首先建j．了用原子吸收法测定磁性靶向制剂中磁性成分含虽的方 法，考查了磁性靶向制剂中磁}生成分一Fc，04在动物体内的分布与靶向性。 在小鼠尾静脉给予MMC-PBCA-MNPS胶伴溶液后，测定了不涮时问点各个主要器官的磁十牛成分的含量。比较了各事藤器官磁性成分的靶向率～R，04的 在小鼠尾静脉给予MMC-PBCA-MNPS胶伴溶液后，测定了不