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梅毒血清学检测的操作规范 主要内容 梅毒概述 梅毒血清学检测方法 梅毒检测技术规范 梅毒是一种几乎可以侵犯全身所有器官,而产生多种症状和体征的慢性传染性疾病。 十六世纪初由欧洲传入亚洲,后蔓延我国。梅毒又称为杨梅疮、广东疮、疳疮、下疳、霉疮等。 梅毒概述 梅毒螺旋体生物学特征 病原体为苍白密螺旋体苍白亚种,不易着色 直径 0.10~0.15μm,有8~14个致密而规则的 小螺旋,两端尖直,运动活跃,运动方式多样 抵抗力极弱,对温度和干燥特别敏感 对青抗生素敏感 梅毒传播途径—性传播 性接触是主要传染途径 未经治疗的患者在感染后1年内具有传染性 随着病期的延长,传染性越来越小 感染后2年,通过性接触一般无传染性 梅毒传播途径—母婴传播 妊娠7周时,梅毒螺旋体即可通过胎盘传播 未经治疗者,虽已无性传播(病期2年),但妊娠时仍可传染胎儿,病期越长,传染性越小 梅毒传播途径—其他途径 输血传播 接触传播 接触部位附有梅毒螺旋体 日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径 梅毒的分期 一期梅毒 硬下疳和/或腹股沟淋巴结肿大 二期梅毒 病期在2年内有多形性皮疹等 三期梅毒 病期在2年以上,可有皮肤黏膜损害等 隐性(潜伏)梅毒 胎传(先天)梅毒 梅毒的诊断 病史 症状 实验室检查 梅毒的实验室检查对诊断有重要意义 梅毒实验室检测技术 病原学检测 血清学检测 梅毒实验室检测的特点 临床表现 取材部位 检查方法 一期梅毒 溃疡 淋巴结 病原学检查 血液 血清学检查 二期梅毒 皮损 淋巴结 病原学检查 血液 血清学检查 潜伏梅毒 血液 血清学检查 三期梅毒 血液 血清学检查 神经梅毒 血液 血清学检查 脑脊液 细胞、蛋白量检查VDRL等 梅毒的病原学检测--显微镜检测法 暗视野显微镜检查 镀银染色检查 暗视野显微镜检查 标本类型:梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液、淋巴结穿刺液 镀银染色检查 基本原理:梅毒螺旋体具有亲银性,可被银溶液染色,从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体 结果:棕褐色的梅毒螺旋体 非梅毒螺旋体抗原血清学检测 (非特异性梅毒抗体) 梅毒螺旋体抗原血清学检测 (特异性梅毒抗体) 梅毒血清学检测分类 非梅毒螺旋体抗原血清学检测 原理 人感染梅毒螺旋体后,组织受到破坏释放一种类脂成分,与梅毒螺旋体结合形成完全抗原,刺激机体在3~4周时产生类脂质抗体(反应素)。 抗体的作用 治疗监测和疗效监测 无保护作用 VDRL(性病研究实验室试验) USR(不加热血清反应素试验) RPR(加速血浆反应素环状卡片试验) TRUST(甲苯胺红不加热血清试验) 非梅毒螺旋体抗原血清学检测方法 抗原基本成分为心磷脂、卵磷脂和胆固醇 抗原抗体集合形成复合物,凝集成网状肉眼可见的沉淀颗粒 试验方法敏感性和特异性基本相似 操作简单,价格便宜 可定量检测 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 VDRL USR RPR TRUST 抗原成分 心磷脂、卵磷脂、 胆固醇 同前+EDTA+氯化胆碱 同前+EDTA+氯化胆碱+活性炭 同前+EDTA+氯化胆碱+甲苯胺红 抗原稳定性 不稳定,1天 稳定4℃ ~8 ℃ 保存12个月 稳定4℃ ~8 ℃ 保存12个月 稳定4℃ ~8 ℃ 保存12个月 血清试验前处理 需灭活 不需灭活 不需灭活 不需灭活 反应板及结果判断 玻片,肉眼或显微镜 玻片,肉眼或显微镜 纸卡片,肉眼 纸卡片,肉眼 注释 唯一用于检查脑脊液的试验,诊断神经梅毒 结果容易判断 结果容易判断 四种非特异性试验方法比较 非梅毒螺旋体抗原血清试验 RPR/TRUST 基本原理:在心磷脂、卵磷脂和胆固醇等组成的抗原中加入活性炭/甲苯胺红,与待检血清中的反应素结合,形成肉眼可见的红色絮状物。 试验所需仪器 测速要求:100±2转/分钟 试验操作—定性检测 (1)加样:吸取50μL血清/浆放在 卡片圈中,并均匀地涂布在整个圈中 (2)加抗原:将抗原轻轻摇匀,用9号 针头加1滴抗原(16.7ul) (3)反应:将卡片置水平旋转仪旋
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