TMB显色液(ELISA HRP显色).pdfVIP

北京雷根生物技术有限公司 TMB 底物显色试剂盒(ELISA,HRP 发光) 简介： 3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB)是非常优越的酶免试验显色剂，能溶解于多种有机溶剂 和双蒸水中，为稳定的无色溶液，与适量过氧化脲或双氧水与缓冲液混匀后，与过氧化物 酶作用产生清晰的蓝色产物，极易观察。由于其灵敏度高，配制后的工作液稳定，加上无 致癌特性，被广泛用于酶联免疫(ELISA)试验和尿试纸的检测反应等。TMB 主要应用于酶联 免疫吸附实验(ELISA) ，经典的方法是采用A、B 液分开配制，使用前再混合的方法，并且 长期存放稳定。本试剂一般情况下为无色，有时略显浅蓝色或浅黄色。TMB 显色液特点是： 灵敏度高，稳定性好，显色终止后读数稳定。背景低：底物溶液在650nm 检测时检测OD 值小于0.04。 组成： 编号 IT0001 IT0001 Storage 名称 2 ×50ml 2 ×100ml 试剂(A): TMB 显色液A 50ml 100ml 4℃ 避光 试剂(B): TMB 显色液 B 50ml 100ml 4℃ 避光 试剂(C): TMB 显色液C 100μl 2 ×100μl RT 使用说明书 1 份 操作步骤(仅供参考) ： 1、用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗) ，取试剂(A)、(B)、(C) ，按A ：B ：C= 5000:5000:4 混合，待达到室温后即可使用。 2、加液：加完HRP 结合物并温育一定时间后，洗板3 ～5 次，每孔加TMB 显色液。 根 据个人实验需要，在室温(15 ～25℃)或 37℃下温育。 3、终止：加等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。 4、读数：终止反应后30min 内在450nm 处读数。 注意事项： 1、如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB 底物反应过于强烈。 2、为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数，或者进一步稀释一抗和/或 HRP 结合物，再 次进行试验。 有效期： 12 个月内有效。