第三章食用菌菌种制作.PPT

使一定工作区达到相对无菌、无尘状态的电器 3.超净工作台 双人 单人 要求:前端为导热性好的金属材料 枪 匙 钩 铲 镊 耙 针 环 接种 4.接种工具 固体菌种接种枪 液体菌种接种枪 返回本节 四、菌种培养设备 1.培养箱培养少量菌种的恒温电器（20~40℃） 2.培养室培养大量菌种的恒温房 要求 光线暗密闭好、通风性强能升温、降温（空调机）有培养架 贮 藏 室 远离污染源 低温（4~8℃） 干燥、通风、遮光 用前要严格消毒杀虫 地面常撒石灰粉 保藏原种、栽培种： 五、菌种保藏设备保藏母种：冰箱（4℃）左右 基本概念 杀死一切微生物，包括芽孢。 灭菌 分为 杀菌：菌体尚存溶菌：菌体消失 消毒：只杀死病源菌，未伤及芽孢防腐：暂时抑制微生物生长除菌：用冲洗、过滤等机械的方法，除去微生物 三、常用的消毒灭菌药品 化学消毒杀菌剂广泛用于食用菌生产过程中的消毒灭菌，其主要种类有： 1、重金属盐类：如汞、银、铝、锌、铜等。 杀菌机理：是通过与蛋白质结合而引起蛋白质变性。低浓度的重金属对微生物起到抑制或杀死作用。微生物浸在0.1~0.5 %硝酸银升汞溶液中，几分种就会死亡。 常用0.1~0.2%升汞溶液对玻璃器皿、非金属器械及用于菌种分离的菌菇、菇木进行表面消毒。 2、氧化剂：如高锰酸钾、过氧化氢、臭氧、漂白粉等。 杀菌作用：通过强烈的氧化作用，破坏微生物的原生质或酶蛋白质结构。 （一）、消毒杀菌剂 3、还原剂：如甲醛，5%的甲醛可杀死细菌芽孢和真菌孢子。 甲醛能与微生物细胞蛋白质的氨基酸结合，引起蛋白质变性。使原生质失去正常活动能力。 4、表面活性剂：如乙醇，75%乙醇的消毒力最强，过高过低消毒效果都差。 常用于接种前手指消毒及不耐热制品的消毒。 5、其它消毒剂：石灰，以4份生石灰加入1份水，即生成熟石灰、并放出热，具有杀菌作用。硫磺，常用于培养室和出菇房等空间熏蒸杀菌。杀菌机理：硫磺粉燃烧后产生二氧化硫，二氧化硫与水作用生成亚硫酸，亚硫酸能夺取菌体细胞中的氧，菌体细胞因脱氧至死。 （二）、表面消毒杀菌 表面消毒常用于菌种的分离材料、接种人员的手、器材、工作台面、墙壁等的杀菌处理，表面消毒剂的种类很多，一般是通过涂抹、喷雾、浸泡、洗刷等方法使用。 1、菌种分离材料的表面消毒：子实体未外露的，用0.1%升汞溶液浸泡1分钟；子实体已外露的种菇材料，只能用75%酒精棉球擦菌盖表面和菌柄，不能浸泡在升汞溶液中。 2、手的表面消毒：先用肥皂洗手，再用1~2%来苏尔等溶液浸泡2分钟。接种前用之于75%酒精擦手。 3、接种工具的消毒杀菌，先用75%酒精擦拭刀片、镊子、接种铲等工具，然后用酒精灯火焰燃烧。 4、器皿的杀菌：利用高温空气进行干热灭菌，具体方法是：，生产中也常用高压蒸汽灭菌法对器皿进行灭菌。 5、墙壁、台面、菇床的表面消毒：常用2~5%的漂白粉洗刷接种室、培养室墙壁、地面、床架、用具等。 （三）、室内空间杀菌 接种箱、培养室、出菇房的空间消毒主要采用紫外线杀菌和气体灭菌法，还可辅以空间喷雾的方法，增强杀菌的效果。 1、紫外线杀菌法 适用：一般应用于无菌室、接种箱、超净工作台内的灭菌。只适用于空气和物体表面的消毒。 使用方法：一般照射20～30min，可杀死空气中95%的细菌。应该在黑暗中使用紫外线。 杀菌机理：导致菌体细胞内核酸和酶发生光化学变化，而使细胞死亡；紫外线可使空气中的氧气产生臭氧，臭氧也具杀菌作用。 2、气体灭菌法（熏蒸杀菌法） 适用：接种箱、接种室和菇房消毒。 常用药物：40%甲醛溶液、硫磺、菇保一号、科达气雾消毒盒、克霉灵气雾消毒剂。 第二节　母种制作 一、母种培养基制作 二、菌种分离 三、母种扩繁 （一）营养液制作(PDA培养基)　 1.　准备工作 　（1）材料 马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、琼脂、水。 　（2）仪器用具及消毒药品 电炉子、铝锅、玻璃棒、漏斗、纱布、止水夹、漏斗架、切菜小刀、切板、1000ml烧杯、捆扎绳、棉花、试管（18mm×180mm）、试管架、铁丝筐、1.5cm厚的长木条、标签、天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、牛皮纸、皮筋、纱布、恒温培养箱、手提式高压灭菌锅、超净工作台或接种箱、接种铲、酒精灯、火柴、记号笔等。消毒药品包括：75％的酒精棉球、0.25%新洁尔灭溶液、烟雾消毒王或菇保一号等。 一 母种培养基制作 　　 将学生分成几组，分别负责切土豆、称量水、称量药品、处理琼脂等。 2.称量、材料预处理 　　将切好的马铃薯块加适量水后放入铝锅或电饭锅中，煮至酥而不烂。 3.熬制 4.　过滤、加可溶药物　 用双层纱布过滤，取滤汁， 放在铝锅中加入糖。 　 在沸腾状态下加入琼脂粉，直到琼脂完全溶化为止，定容至1000ml。