布病病原学及血清学.PPTVIP

3.2.2 布氏菌的血清学诊断方法 虎红玻片凝集试验 (RBPT) 试管凝集试验 (SAT) 抗球蛋白试验 (Coomb`s试验) 含巯基化物处理血清后的凝集试验（2ME 试验） 补体结合试验 (CFT) 乳环凝集试验 (MRT) 酶联免疫吸附试验 (ELISA) 金标法 荧光偏振方法 （FPA） 凝集试验：细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团块，这一类反应称为凝集反应。 虎红玻片凝集实验 原理：利用酸性带色的抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性，主要检查血清中的IgG类抗体。评价：简便快速、容易操作，适用于基层大面积检疫，容易出现假阳性，结果仅供参考. 方法：在玻片上加0.03ml被检血清，然后加入虎红平板抗原0.03ml，充分混匀，5min之内观察结果。 结果判定：出现可见的凝集反应就判为阳性；否则就为阴性。 注意事项： 血清静止的温度和时间对实验结果有很大的影响，在一定的时间和温度范围内，放置时间越长，温度越高，假阳性率越低； 患者空腹血清出现假阳性少； 凡是试验中凝集颗粒不规则，大小不匀，片状或絮状，凝集不清澈者，一般为假阳性，否则凝集颗粒规则，大小均匀，凝集清澈者，一般与SAT结果相符，为阳性。 原理：布氏菌侵入机体后，就会刺激机体产生特异性抗体，其可与相应的抗原发生特异性结合，在电解质的作用下，就会形成肉眼可见的凝集反应，也就是用已知抗原查未知抗体。 试管凝集试验 试管凝集试验 阴性 阳性 布氏菌概述 布鲁氏菌病（Brucellosis）是由布鲁氏菌属（Brucella）的细菌侵入机体，引起的人畜共患传染－变态反应性传染病，简称布病,是《中华人民共和国传染病防治法》规定报告的乙类传染病。 1887年英国军医Bruce首先从死于“马耳他热”的英国士兵的脾脏中分离出羊种布氏菌。 1887年，英国军医Bruce从马耳他岛死于“马耳他热”的士兵脾脏中首次分离到羊种布氏菌；1897年丹麦学者和1914年美国学者又分别从流产母牛的羊水和猪流产胎儿中分别分离到牛种布氏菌和猪种布氏菌。 最近半个世纪以来，在布病诊断、免疫、预防和治疗等方面都有较深的发展，1953、1956和1966年又分别发现了绵羊附睾种布氏菌、沙林鼠种布氏菌和犬种布氏菌。 1994年，Foster在英国从海洋哺乳动物体内分离到布鲁氏菌，后来在地中海、南美、澳洲等世界许多地方的海洋哺乳动物体内分离到布鲁氏菌，表明其分布是世界性的。与其它布鲁氏菌种一样，也能引起动物流产，并可感染人。根据其表型和分子生物学特性分成2个种，鲸种布鲁氏菌(B.ceti)和鳍种布鲁氏菌(B.pinnipedialis) 2008年，德国和捷克科学家报道了一个新布鲁氏菌种-田鼠种布鲁氏菌(B.microti)。 2010年德国人Holger C.Scholz等从具有临床症状的乳房移植感染的71岁病人身上分离到一株布氏菌，鉴定结果为一个布鲁氏菌新种，为湖浪种(B.inopinata)。目前尚未得到布鲁氏菌分类小组委员会承认。 1994年分离出的2个海洋种和2008年分离的田鼠种已列入分类，即目前为9个生物种，22个生物型。 生物种 生物型 常见宿主 羊 种 1~3 绵羊和山羊 牛 种 1~7,9 牛 猪 种 1~5 猪、野兔、鹿、鼠类 沙林鼠种 1 沙林鼠 绵羊附睾种 1 绵羊 犬 种 1 犬 鲸 种 1 海洋哺乳动物 鳍 种 1 海洋哺乳动物 田鼠种 1 豚鼠 【9种】 【22型】 2013年，我省分离出3株布鲁氏菌，2014年共分离出20株（绥德7、延川3、定边2、子长2、旬阳2、宝塔区延长宜川麟游各1株）；1991年以前流行优势种型为羊1、2型，1996年后则为羊1、3型 。 陕西省是以羊