实验六 果蝇的三点侧交与遗传作图.ppt

实验六 果蝇的三点侧交与遗传作图 一、实验目的 1、 掌握实验果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。2、 掌握绘制遗传学图的原理和方法,进一步加深对重组值，遗传学图，双交换值，并发率和干涉等概念理解。 二、实验原理 基因图距是通过重组值的测定而得到的 a、b、c三个基因是连锁的，要测定三个基因的相对位置可以用野生型果蝇（+++，表示三个野生型基因）与三隐性果蝇（a，b，c三个突变隐性基因）杂交，制成三因子杂种abc/+++，再把雌性杂种与三隐性个体测交，由于基因间的交换，从而在下代中得到8种不同表型的果蝇，这样经过数据处理， 一次试验就可以测出三个连锁基因的距离和顺序 三点测交或三点试验。 三、实验材料 黑腹果蝇品系： 野生型果蝇（+++）长翅、直刚毛、红眼。 三隐性果蝇（msn3w）小翅、焦刚毛、白眼。 四、实验器具和药品 用具：解剖镜，麻醉瓶，毛笔，镊子，吸水纸，培养瓶 药品：乙醚。 五、实验步骤 1、果蝇饲养 2、选择处女蝇：实验前2-3天陆续按组合收集8小时内羽化的果蝇，分离♀♂ 。 3、收集三隐性个体的处女蝇，培养在培养瓶中，每瓶5—6只。 4、杂交 挑出野生型雄体放到处女蝇瓶中杂交，每瓶5—6只。 5、记录杂交日期和亲本组合名称，并注明班级学号。 7—8天以后，出现蛹。倒去亲本。 再4—5天后，蛹孵化出子一代（F1）成蝇，可以观察到F1雌蝇全部是野生型表型，雄蝇都是三隐性。 从F1代中选20—30对果蝇，放到新的培养瓶中继续杂交。每瓶5—6对。 7—8天后，蛹出现，倒去亲本。 再4—5天后，蛹孵化出子二代（F2）成蝇，开始观察。 把F2果蝇倒出麻醉，放在白瓷板上，用实体显微镜检查眼色、翅形、刚毛。各类果蝇分别计数。检查过的果蝇倒掉。过2天后再检查第二批，连续检查8—10天，即3—4次。在25℃下，自第一批果蝇孵化出10天内是可靠的，再迟时F3代可能会出现了。要求至少统计250只果蝇。 有幼虫、蛹 去亲本 处女蝇的选取 8-10小时内羽化的果蝇分离♀♂ ①:pm10:00去成蝇 ②:am6:00,pm2:00,pm10:00分别收集分离♀♂成蝇 ③:am8:00收集分离♀♂成蝇；每瓶培养基放置5-6对亲本果蝇。 六 实验结果 测交后代表型 观察数 m-sn重组 sn-w重组 m-w重组 sn w m + + + + w + sn + w sn + + + w m sn w + + + m 将观察的结果填入表格中 果蝇杂交注意事项 1、母本必须是处女蝇 2、子一代羽化之前必须去掉亲本 3、F1代必须转入新的培养基中进行自交 4、亲本果蝇麻醉时，麻醉时间不宜过长 5、麻醉果蝇时，必须倒入空瓶，严禁在 培养瓶中进行麻醉 思考题 1、计算基因间的重组值 2、绘制遗传学图，把3基因定位在染色体上 3、计算并发率和干涉 （并发率=观察到的双交换率/两个单交换频率的乘积 干涉=1-并发率） * 去亲本：杂交后7-8天 5、F1代性状观察及自交：去亲本后4-5天进行，连续检查2-3天；移5-6对进行自交（无需处女蝇）。 6、再去亲本：自交后7-8天。 7、记录结果：去亲本后4-5天进行，连续统计7-8天。 * 去亲本：杂交后7-8天 5、F1代性状观察及自交：去亲本后4-5天进行，连续检查2-3天；移5-6对进行自交（无需处女蝇）。 6、再去亲本：自交后7-8天。 7、记录结果：去亲本后4-5天进行，连续统计7-8天。