实验一减数分裂演示文稿.ppt

实验一、 减数分裂 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 一、实验目的 掌握花粉母细胞染色体制片技术； 了解减数分裂各时期染色体的变化特征 二、实验原理 减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中一种特殊的细胞分裂方式。 高等植物花粉母细胞经减数分裂产生四个小孢子，染色体数目已减半为n。小孢子进一步发育为花粉粒。 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 减数分裂过程 (一)、间期(前间期) (二)、减数第一分裂 (三)、间期 (四)、减数第二分裂 前期I 中期I 后期I 末期I 前期II 中期II 后期II 末期II 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 玉米雄穗上的分裂时期  除太老的分枝以外，在每一个分枝中，以中部偏上区域为比较成熟的部分，从此往尖端或基部，小穗逐渐幼嫩。通常在一个分枝上从幼嫩的部位向较为成熟的区域混合制片，可以在一个片子中看到小孢子形成过程中的各个时期。 玉米小穗是成对存在的，无柄小穗的发育时期比邻近的有柄小穗的发育时期要早，每小穗中有两朵小花，各有花药3个，第一朵小花比第二朵小花幼嫩，第一朵小花的分裂时期依各小穗着生部位不同有一定的顺序性，而同一朵小花的三个花药几乎处于同一发育时期。据此可以进行适当选材。 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 玉米雄蕊 镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、吸水纸、酒精灯 卡诺氏固定液（95%乙醇：冰乙酸=3：1） 改良苯酚品红 三、实验材料、器具及试剂 四、实验方法与步骤 取材 固定 染色压片 镜检 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 1.取材： 选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时期不同。 玉米：抽雄前两周（大喇叭口期），雄花序所在部位用刀片纵向划一切口，用镊子取出花序分枝。此时雄花序先端小穗颖长4mm左右，花药长2～3mm。 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 玉米大喇叭口期 玉米雄花序 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。 一般采用卡诺氏固定液，无水酒精：冰醋酸＝3:1，可用95％ 乙醇代替无水乙醇。 如需长期保存，可先用70%酒精冲洗2次然后转入70%酒精中保存。 注意：固定液时应现配现用，固定时不要在阳光下暴晒。 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 2．固定： 3、制片：先将少量雄穗分枝取出置于培养皿内，加进少许固定液，以防干去。然后用弯头解剖针从适当大小的小花内挑出花药3-4个，以蒸馏水冲洗干净，置于载玻片上。加上一滴改良苯酚品红染液，以刀片切断花药，再用解剖针尖轻压，或用小镊子轻轻挤压，挤出花粉母细胞，尽量挤净，然后除去杂质，微微捣开成堆的花粉母细胞，染色3-5分钟，盖上盖玻片。 4、压片：用拇指均匀用力垂直压下 注意不要使盖片移动 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 吸去小穗过多保存液 置于载玻片中央 挑出花药，滴染液 将花药横向切断挤压花药，使花粉母细胞从切口处逸出 7.镜检观察 先低倍后高倍 具体使用参见显微镜的使用方法 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 减数分裂前期 I 细线期 偶线期 偶线期 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 粗线期 双线期 终变期 中期 后期 后期 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 前期II 中期II 后期II 末期II 四分体 小孢子 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 附：显微镜操作和使用 显微镜托住底盘拿放 调节目镜间距和目镜微调，使两个眼睛视野相同和清晰，防止眼睛疲劳。 先低倍镜，后高倍镜观察，高倍镜下不准用粗调。 高倍镜下不得取放载玻片。转开物镜拿放玻片 显微镜不用时，要把电源电压调至最低使用结束：电压或光亮度调至最小，关闭并拔下电源，降低载物台，最低倍物镜或无目镜的镜筒居中，防尘罩。 使用完显微镜要登记，请老师验收方可离开。 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 注意事项 爱护显微镜 一次取材不要太多 取完载玻片，盖上染色缸盖子，以免酒精挥发 酒精灯使用注意安全 用过的载玻片必须刷洗干净再放回染色缸，用过的盖玻片丢弃 使用过的纱布、滤纸、盖玻片放到废品杯或垃圾桶，不得直接冲入水池 值日生打扫卫生、检查仪器及门窗 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 遗传育种学实验 中国海洋大学水产学院 写出制片步骤流程图 制作两张质量较好的临时片，数码采集各时期分裂相(6个以上时期），说明各时期和特点 分析自己制片操作过程中出现的问题及可能原因 提交3-5张清晰的含各分裂相的照片 五、作业 * 1、取材：选取适宜的小花或小穗是实验的关键。 玉米