GB/T 31810-2015玉米褪绿斑驳病毒检疫鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01 k__ 、 B 16 G邑 中华人民共和国国彖标准 GB/T 31810—2015 玉米褪绿斑驳病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Maize chlorotic mottle virus 2015-07-03 发布 2015-11-27 实施 GB/T 31810—2015 ■ i r ■ ■ i 刖 吕 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会 (SAC/TC 271)提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共 和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验 检疫局。 本标准主要起草人：张卫东、张永江、张慧丽、王岚、杨翠云、廖力、李旻、迟远丽、徐淼锋、权永兵、 闻伟刚、陈其文. T GB/T 31810—2015 玉米褪绿斑驳病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了玉米褪绿斑驳病毒检疫鉴定的方法。 本标准适用于可能携带玉米褪绿斑驳病毒的种子、种苗等植物繁殖材料中玉米褪绿斑驳病毒的检 疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T 2122进出境植物及植物产品检疫抽样 SN/T 2964—2011植物病毒检测规范 3仪器设备、设施和主要试剂 3.1仪器设备 酶标仪、洗板机、普通PCR仪、荧光PCR仪、微量分光光度仪、生物安全柜、高压灭菌锅、培养箱、微 量天平（感量：O.OO1 g）、冰箱、离心机、酸度计、水浴锅、 电泳仪、凝胶成像系统、移液器 （1 000 “L、 200 卩L、100 卩L、10 yL、2.5 卩L）。 3.2设施 隔离温室（10 °C〜30 °C）O 3.3主要试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯。主要试剂和缓冲液见附录B中B.1和附录C中C.lo 4抽样和检测样品的制备 4.1抽样 抽样按照SN/T 2122的规定执行。 4.2检测样品的制备 4.2.1种子类 挑取至少500粒种子（重点挑取畸形、不成熟的种子）样品，经3%次氯酸钠（NaClO）表面消毒 10 min后,将种子置于灭过菌的土壤中，在 宜的发芽温度（25 °C-28 °C）条件下催芽，直至长出3片〜 4片真叶进行检测。选取具有褪绿、畸形等症状的植株幼嫩叶片全部进行编号检测，同时随机抽取至少 20株无症状植株样品进行混样检测。 1 GB/T 31810—2015 4.2.2种苗类 对于有症状的种苗类样品单独检测，重点选取表现症状种苗类样品的幼嫩叶片；对于无症状的种苗 类样品至少选取20株的幼嫩叶片进行混样检测。 5检疫鉴定方法 5.1 DAS-ELISA 检测