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19 细菌的生化反应 检测细菌对各种基质的代谢作用及代谢产物,借以区别和鉴别细菌种类的生化试验 细菌的生理 光学性质:半透明,用比浊法估计数量 表面积相对较大 带电现象:pI7,中性溶液中带负电G+:pI=2-3;G-:pI=4-5,G+与碱性染料结合更紧密 半透性:细胞壁与细胞膜均为半透膜 高渗透压:G+:20-25;G-:5-6 细菌的化学组成 小分子物质:水(80%),无机盐(10%) 大分子物质:蛋白质, 糖类, 脂类, 核酸 特殊化学物质: 肽聚糖,胞壁酸,磷壁酸,D型氨基酸,二氨基庚二酸(DAP),吡啶二羧酸(DPA)等 细菌的物理性质 细菌的生长繁殖与培养 营养物质:水、碳源、氮源、无机盐、生长因子 环境因素: 营养物质 pH:多数细菌和放线菌的最适pH为7.2-7.6 霍乱弧菌:8.0-9.2; 结核杆菌:6.5-6.8 温度:一般病原菌最适生长温度为37℃ 浅部真菌:26-28 ℃ 气体:O2,CO2 渗透压 霍乱弧菌:8.0-9.2 结核杆菌:6.5-6.8 浅部真菌:26-28 ℃ ⑤ 渗透压 气体: 根据对氧气的需要与否分为 专性需氧菌: 必须有氧,具有完善的呼吸酶系统 不发酵,氧化磷酸化 结核杆菌, 霍乱弧菌 专性厌氧菌: 必须无氧,缺乏完善的呼吸酶系统 发酵,缺乏相关酶类,氧有毒害作用 破伤风杆菌,脆弱类杆菌 兼性厌氧菌: 有无均可。大多数病原菌 微需氧菌: 低氧压(5%~6%)中生长,氧浓度大于10%对其有抑制作用 幽门螺杆菌,空肠弯曲菌 生长状况 专性需氧菌: 必须有氧 O2 专性厌氧菌: 必须无氧 微需氧菌:多则无益 兼性厌氧菌: 有无均可 个体繁殖:二分裂 细菌的生长繁殖 群体繁殖:生长曲线 迟缓期(lag phase)代谢活跃,分裂迟缓 对数期(log phase)数量以几何级数增长。染色性、生理活性典型 稳定期(stationary phase)繁殖减慢,死菌数增加,代谢产物积聚 衰亡期(decline phase)死亡数超过活菌数,菌体自溶 对数期细菌的大小、形态、生物活性最典型 稳定期形成外毒素、抗生素、芽胞等 decline log lag stationary lag phase logarithmic phase stationary phase decline phase 培养 培养基:根据营养组成和用途 基础培养基 basic medium 营养培养基 basic medium 选择培养基 selective medium 鉴别培养基 differential medium 厌氧培养基 anaerobic medium SS琼脂:肠道致病菌的选择鉴别培养基 培养基:根据物理状态 液体培养基 无琼脂 增菌 菌膜、均匀浑浊、沉淀生长 固体培养基 1% ~ 2%琼脂 分离纯化(平板)、增菌(斜面) 半固体培养基 0.3% ~ 0.5%琼脂 运动力、短期保存 细 菌 的 培 养 性 状 液体培养基 半固体培养基 平 板 菌落:细菌在固体平板上划线分离,培养后表面生长有肉眼可见的散在的细菌集团。一个菌落是由单个细菌繁殖的后代堆积而成的 colony 细菌的初步鉴定: 菌落的大小、形状、颜色、气味、透明度、表面(光滑/粗糙,湿润/干燥)、边缘、溶血 人工培养细菌的用途 在医学中的应用 感染性疾病的病原学诊断 细菌学研究 生物制品的制备 在工农业生产中的应用 在基因工程中的应用 细菌的分类 界、门、纲、目、科、属、种、亚种、型、菌株,在细菌学中常用的是属和种 菌种:生物学性状基本相同的细菌群体(彼此间有70%或70%以上DNA同源性) 菌属:性状相近关系密切的若干菌种组成 同一菌种的各个细菌,虽性状基本相同,但在某些方面仍有一定差异,差异较明显的称为亚种或变种,差异小的则为型 对不同来源的同一菌种称为该菌的不同菌株 命名法—拉丁双名法 Staphylococcus aureus S. aureus Escherichia coliE. coli 金黄色 葡萄球菌 大肠埃希菌 属名 属名 种名 种名 泛指某一属细菌,不特指其中某个菌种 属名后加sp. (单数)或spp. (复数) e.g., Salmonella sp. 表示沙门菌属中的细菌 常见生化反应 糖发酵:酸、醛、醇、酮、气体等(乳糖发酵)不分解:-分解产酸不产气:+分解产酸产气:⊕ 硫化氢试验:分解含硫氨基酸,生成硫化氢,与培养基中醋酸铅或硫化亚铁反应,生成黑色沉淀 Dextrose 葡萄糖 枸橼酸利用试验 左侧为阳性(深蓝色) 右侧为阴性对照 吲哚试验 中为阴性对照 右侧为阳性(上层液面呈红色) 甲基红试验 中
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