植物生理学试验技术课程教案-水产科学与技术试验教学中心.pdf

《植物生理学实验技术》课程教案 实验：植物呼吸作用和光合作用强度的测定 授课学期：2008-2009 学年第一学期 课程时数：4 学时 授课对象：养殖0711、0712、0713 授课教师：张丽莉助教 实验教材：《基础生物学技术实验指导书》 集大水产学院自编讲义.2008 年 主要教学参考书： 潘瑞枳主编. 《植物生理学 》. 北京：高等教育出版社. 2005 水产学院 2008 年 一、目的意义及要求 意义：光合作用强度是代表植物光合作用性能的一个重要指标，往往作为新 品种选育的一个生理指标。而呼吸作用是植物代谢中心，可以作为植物生理活动 的指标。 要求：本实验要求掌握测定的原理及方法 二 、实验原理 光合作用与呼吸作用强度的测定，一般是测定一个盛有植物的密闭系统中 CO2 或O2 的变化量。真正光合速率=表观光合速率+呼吸速率，黑白瓶法是根据 这个原理而设计的。 测水中溶解氧的含量是用著名的（Winkler ）温克勒法，其原理是：根据氢 氧化亚锰在碱性溶液中被水中的氧氧化为四价的锰化合物的反应，同时又定量地 与全部溶解氧结合着，当再加入盐酸或硫酸时，四价锰化合物又被还原而成亚锰， 同时将早先加入的碘化钾氧化，使其产生游离碘，它在量上相当于水中溶解的氧 量，然后以硫代硫酸钠溶液滴定所产生的碘（方法与原理同海水化学中溶解氧的 测定）。 三、材料、器材 材料：石莼 器材： 500mL 三角瓶（黑白各一、带橡皮塞）2 个 小碘瓶6 个（100mL），烧杯一个（500mL） 移液管 滴定管一支（碱性），250mL 三角瓶6 个 量筒：100mL 2 个；10mL 1 个, 100℃的温度计,天平. 玻璃棒一支,虹吸管 四、测定步骤： 1、 溶液浓度的标定：略 2、处理用的三角瓶及小碘瓶体积的标定：将黑、白三角瓶及小碘瓶分别编号， 然后装满水，盖上盖子或塞子，把多余的水倒掉，然后用容量瓶及移液管测 瓶内的水的体积（要求精确到0.5ml）。分别记着大三角瓶及小碘瓶的溶剂。 将表面玻璃洗净烘干，在扭力天平上称重。要求精确到0.005g，并编号记于 实验报告中。 3、处理：将黑白三角瓶各一个，用海水冲洗两次，然后用虹吸方式，装满海水(虹 吸管尖应达三角瓶底部、取出时，不要有气泡形成) 。并使水从瓶口溢出整瓶 的三分之一左右，然后盖上盖子（不要有气泡）。 先取生长正常的大型海藻数棵： 藻体分别放入黑、白三角瓶中，用玻璃棒搅动一下，然后塞上塞子（注意里 面不能有气泡）。放在光亮的地方，从这时开始计时，处理一小时后结束（为了 顺利进行工作，黑、白两瓶处理时间最好前后相隔15 分钟），处理过程重，要摇 动三次，取样测定时 O2 时，也要摇动一次，在处理过程中，要随时检查，若发 现瓶中有气泡出现时，就要适当缩短处理时间，注意记录处理海水时的温度。 水中含氧量的测定： 首先用小碘瓶2 个，用海水冲洗两次，然后用虹吸方式装满海水，并要少量 水溢出，盖上盖子（里面不能有气泡），将盖外的 水倒去，然后用1ml 移液管顺 序的加入1mlMnSO 或MnCl 溶液和1mlKI－NaOH 溶液（注意取试剂时，将移 4 2 液管尖端插入试剂中，只要能吸起即可）。取出移液管后，在碘瓶内，液面上方 放出溶液，立即谨慎的 将瓶盖盖好，勿使空气进入，溢出的海水倒掉。用手指 按住瓶盖，用力反复颠倒碘瓶摇动，直到沉淀与液体完全混合为止。混合后将碘 瓶静置，让沉淀尽可能完全下沉到瓶底。 样品滴定： 小心打开瓶盖，用移液管加入 1：1 的H SO ml ，加酸时，移液管尖靠近沉 2 4 淀，但注意不要接触沉淀。小心抽出移液管，盖上瓶盖，用手指按住瓶塞，反复 颠倒碘瓶摇动，使沉淀全部溶解，呈黄色的清液。 将碘瓶中的溶液小心倒入三角瓶中（注意不要损失一点溶液，并放旁边待冲 洗）,然后用 Na S O 滴定，待溶液变成浅黄色后以同样的方法，取经过藻体处 2 2 3 理后的黑、白瓶中的水进行含氧的测定，注意：将虹吸管插入有藻体的黑白瓶中 取水时，动作要迅速，虹