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图10-2大肠杆菌拟核的电子显微镜图,显示释放出的染色体DNA及数个质粒DNA 图10-24 大肠杆菌的环状连锁图。图距用min表示,总长为100 min 图 10-12 黎德伯格和泰特姆的杂交试验, 证明大肠杆菌发生遗传重组 + - 发现长出了一些原养型的菌落。这种原养型细胞的出现是由于转化还是由于细胞与细胞直接接触而发生的遗传物质交换和重组?为了解答这个 问题,Davis (1950)设计了 U型管实验 细菌不能透过,但大分子 (DNA)可以 在任何一臂内都没有出现原养型细菌。这说明两个菌株间的直接接触--接合,是原养型细胞出现的必要条件。 Hayes(1952)试验证明,在接合过程中遗传物质的交换是一种单向的转移: 供体(雄性)→ 受体(雌性) 1、F因子 Hayes和Cavalli-Sforza(1953)发现,供体有一个性因子即致育因子--F因子 ,由DNA组成, 是染色体外的 遗传物质。其 组成结构: E.coliF因子存在状态有三种类型: ①没有F因子,即“F–” ②自主状态的F因子,即“F+” ③整合的F因子,即“Hfr” 2、接合过程 F+×F- ↓ F+ → F+ F- → F+ F因子偶然地(10000个F+细胞中有一个)能整合到细菌染色体中去,就可能引起染色体的转移 5’ 图 10-16 两个E.Coli 细胞杂交的电子显微镜照片(X 34,300) 性伞毛/接合管 Hfr×F- ↓ Hfr → Hfr F- → F- 接合开始,F因子仅有一部分进入F–细胞,剩下部分基因只有等到细菌染色体全部进入到F–细胞之后才能进入,然而转移过程常常中断 5’ 受体细胞常常只接受部分的供体染色体,这些染色体称为供体外基因子,而受体的完整染色体则称为 受体内基因 子,这样的 细菌称为部 分二倍体或 部分合子、 半合子 发生单交换时: 发生双交换时: 第三节 细菌的遗传分析 一、转化 二、接合 F因子 (F-、F+、Hfr) 供体 受体 第一节 细菌和病毒的特点 第二节 噬菌体的遗传分析 3、中断杂交试验及染色体作图 为了证明接合时遗传物质从供体到受体细胞的转移是直线式进行的,1957年Wollman和Jacob设计了一个著名的中断杂交试验: ? Hfr:thr+leu+lac+gal+azistonsstrs F- : thr-leu-lac-gal-aziRtonRstrR ? 每隔一定时间取样,放在食物搅拌器内搅拌 ? 培养在含str的完全培养基上, Hfr被杀死 ? 用影印培养法测试形成的F-菌落的基因型, 确定每个基因转入F-的顺序(时间) ? 根据基因转入F-的时间,进行细菌染色体作图 ? ? ? ? ? ? 图10-19 中断杂交后,重组体中Hfr遗传性状出现的频率 图 10-20 沃尔曼和雅各布的中断杂交试验 表示Hfr菌株的基因是以直线方式进入F–细胞的 thr leu azi ton lac ga F O 8 8.5 9 11 18 25 min 根据中断杂交实验作出的大肠杆菌连锁图 用不同的Hfr菌株进行中断杂交实验,基因转移的原点(O)和转移的方向不同,说明F因子和细菌染色体都是环状的。 Hfr的 类型 基 因 转 移 顺 序 HfrH 1 2 3 AB312 0 thr pro lac pur gal his gly thi 0 thr thi gly
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