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优化仪器、方法和样品,以发挥 Agilent InfinityLab Poroshell 120, 1.9 µm 色谱柱的最大潜能 应用简报 整体分析 作者 摘要 Anne Mack 通过对六种化合物进行等度洗脱分析,来验证仪器、方法和样品这几个变量 安捷伦科技公司 对色谱柱性能的影响。在本研究中使用的是高效 Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2.1 × 50 mm, 1.9 µm 色谱柱,其能够产生接近 14000 的塔板数。主 要研究了系统毛细管、检测器流通池、数据采集速率、进样量、样品溶剂和 样品浓度对色谱柱性能的影响。 前言 中,柱外体积的影响会更加明显。就 2.1 × 50 mm, 1.8 µm 色谱柱而言,当柱外体积仅为 2 µL 时,柱效便开始降 表面多孔颗粒填料液相色谱柱是液相色谱领域常用的工 低。另外,我们发现,即使柱外体积在 1.2-9.1 µL 的范 具。与对应的全多孔颗粒色谱柱相比,这种色谱柱能够 围内,都不会对内径较大 (4.6 mm) 的色谱柱产生显著影 在较低压力下获得较高柱效 [1]。这主要是由于该色谱柱 响。进一步的研究表明,当将数据归一化以说明柱效百 的传质距离更短并且填料颗粒的粒径分布明显更窄 [2]。 分比降低与系统柱外体积之间的关系时,5 µm 色谱柱的 表面多孔颗粒填料的当前趋势是通过不断缩小填料粒径 柱效降低程度与相同尺寸的 1.8 µm 色谱柱相似 [3]。 实现柱效的进一步提高。更高的柱效能够加快分析速度 并改善分析结果,分离度和灵敏度均有明显提高。 最后,证明了使用小尺寸的全多孔亚 2 µm 颗粒色谱柱 可减少液相色谱系统体积这一影响 [4-5]。本研究包括对 由于孔径较大(内径为 4.6 mm 或 3 mm)的色谱柱需要 与高效表面多孔 Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 更快的流速才能达到等效的线性流速,因此与其相比, 1.9 µm 色谱柱配套使用的液相色谱仪器、方法和样品进 填充有细小颗粒的小尺寸液相色谱柱的分析速度更快、 行优化。 分离度更出色,从而提高了分析效率,并且减少了溶剂 使用量,而且对液相色谱/质谱和蒸发光散射检测均表 实验 现出更好的兼容性。只需将内径较大的色谱柱更换为内 径较小的色谱柱,便可获得这些益处。但要充分利用小 本实验采用 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统。表 1 示出 尺寸色谱柱,必须对液相色谱仪器、方法和样品都进行 了配置详情。对于部分实验,仪器配置在此基础上有所 优化。 修改。在整个研究中,在必要和适当的时候提供了该配 置信息。本实验中还使用了一根

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