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杨先泉制作 第一节 基因的概念 第二节 重组测验 第三节 互补测验 第四节 缺失作图 第五节 断裂基因和重叠基因 第六节 基因的功能 第一节 基因的概念 二、 基因的类别及其相互关系 1. 编码蛋白质的基因,即有翻译产物的基因。 如结构蛋白、酶等结构基因和产生调节蛋白的调节基因。 2.只转录产生相应的RNA,没有翻译产物,不产生蛋白质的基因。 这些基因转录产物RNA不翻译,如编码tRNA、rRNA的基因。 3. 不转录的DNA区段。 如启动基因、操纵基因。 双重感染试验 重组频率=(2*rII+噬菌斑数/噬菌斑总数)*100% =(2*大肠杆菌K菌株上的噬菌斑数/大肠杆菌B 上的噬菌斑数)*100% 0.02图距单位=1.8*105bp*0.02/1500=2.4bp 最小的结构单位 本泽尔将最小重组单位定义为重组子(recon)。 基因也并非最小突变单位。Benzer提出用突变子(muton)来描述基因突变的最小单位。 但以后研究显示:突变子和重组子都是一个核苷酸对或者碱基对(bp)。所以基因内每个碱基均可能发生突变,任意两个碱基间均能发生交换重组。 第五节 断裂基因与重叠基因 一、外显子与内含子 把DNA序列中被转录成为mRNA的片段称为外显子。 而在成熟mRNA上未反应出的DNA区段称为内含子。 * * 第五章基因精细结构的遗传分析 一、基因概念的发展 二、基因的类别及其相互关系 三、基因与DNA 一、基因概念的发展 (一)遗传因子——控制生物性状的符号 (二)染色体是基因的载体 (三)DNA是遗传物质 (四)基因是有功能的DNA片段 (五)基因的调节控制——操纵子模型 (六)跳跃基因 (七)断裂基因 (八)重叠基因 (九)假基因 指基因家族中不产生有功能的基因产物,但是在结构和DNA序列上与有功能的基因具有相似性。 三、基因与DNA 一个基因大约有500-6000个核苷酸对,但并非DNA分子上任一含有几千个核苷酸对的区段都是一个基因,基因是一个含有特定遗传信息的DNA分子区段。 第二节 重组测验 一、 拟等位基因 杏色眼(wa)、白色眼( w)、野生型( + ) 杏色眼(wa/ wa)与白色眼果蝇( w/Y)杂交,F2应该只有两种亲本的表型,但是F2群体中出现红眼果蝇。 由于F1雌蝇wa+/+w发生交换产生++配子。 Wa +/+ w为反式排列,突变型 ++/wa w为顺式排列,野生型。 顺反位置效应:由于排列方式不同而表型不同的现象。 拟等位基因:紧密连锁的功能性等位基因但不是结构性的等位基因称为拟等位基因。 二、噬菌体突变型 噬菌体形态突变型 寄主范围的突变型 条件致死突变型 三、Benzer的重组测验 Benzer所用的T4噬菌体的rII突变型是遗传学研究中所用的第一个条件致死突变型。T4野生型和rⅡ突变型的区别参见下表。 第三节 互补测验 互补测验(顺反测验):即根据顺式表现型和反式表现型来确定两个突变体是否属于同一个基因(顺反子)。 互补测验:两个突变型同时感染大肠杆菌K菌株时,可以互相弥补对方的缺陷,共同在菌内增殖,释放原来的两个突变型。 那么就必定是一个突变型补偿了另一个突变型所不具有的功能,这两个突变型就称为彼此互补。 二、基因内互补 基因内互补:同一基因内两个不同位点突变使两条原来相同的多肽链转变成两条分别在不同位点上发生变异的多肽链,而后将这两条多肽构成双重杂合子,这两者配合起来,有可能表现出程度不同的恢复酶活性部位,这种现象称为基因内互补。 第四节 缺失作图 一、缺失作图原理 缺失作图必须具有一组重叠缺失突变系作为工具,把要测定的突变型和这一系列缺失突变型分别进行重组测验。凡是能和某一缺失突变型进行重组的,它的位置一定不在缺失范围内,凡是不能重组的,它的位置一定在缺失范围内。 缺失1 缺失2 a b c 细线表示缺失区,二者分别与各种突变体杂交,缺失2只有与a区中突变体杂交才能产生野生型重组体,缺失1只有与c区突变体杂交才能产生野生型重组体,但2个缺失与b区的突变体杂交均不能产生野生型重组体。 二、缺失作图方法 在0.5ml大肠杆菌B菌株培养物中加入1滴缺失型噬菌体和1滴待测的rⅡ突变噬菌体,几分钟之后,取1滴菌液加在灭菌的纸条上,铺在长有大肠杆菌K菌株的平板上,经过培养后如果在纸条覆盖的区域内形成清晰的噬菌斑,则说明他们之间能够发生重组,产生了野生型噬菌体。 通过两个步骤把没有定位的rⅡ突变定位在rⅡ区域47个小片段上。第一步将待测的突变型与最上方的7个
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