植物生理学 实验1_环境因素对植物水分状态的影响.pptVIP

一、植物组织含水量的测定 目的： 1.植物组织含水量与组织水势的关系； 2.植物组织某种成分单位干重水平上的含量比较； 原理： 组织含水量（%） = （组织鲜重-组织干重）/组织鲜重x100 实验材料： 青菜(新鲜叶片，高温贮藏萎蔫叶片)； 打孔器、橡胶垫；称样铝盒； 烘箱、搪瓷盆、棉布手套； 天平 实验步骤 取铝盒4个，依次编号（写于铝盒底部）并称取质量， 选取生长一致的待测材料叶片数枚，用打孔器打叶圆片120（避开叶脉位置，新鲜60枚，萎蔫叶60枚），立即装到上述铝盒内，盖上盒盖称重， 将4个铝盒（已放入30叶圆片，打开盖子）放在搪瓷盘上置于105oC烘箱中烘1-2hr至恒重，称重时需置于干燥器中，待冷却后称重， 若Wn ＝铝盒重， FWn ＝铝盒＋叶圆片 ， DWn ＝烘干后的铝盒＋叶圆片； 5. 植物组织含水量为： （FWn -DWn）/（FWn - Wn） x100 步骤： 将植物组织分别放在一系列梯度浓度溶液中， ①植物组织的水势﹤溶液的渗透势，组织吸水而使溶液浓度 变大； ②植物组织的水势﹥溶液的渗透势，组织水分失水而使溶液 浓度变小； ③植物组织的水势 = 溶液的渗透势，外部溶液浓度不变。 当某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时③ ，该浓度为此植物组织的等渗溶液，组织水势等于该溶液的渗透势。 用溶液的渗透势(ψπ)代表植物水势(ψw)： ψw＝ψπ＝-i C R T（单位：兆帕，MPa） i： 解离系数（蔗糖=1.00;CaCl2=2.60;NaCl=1.80） C：等渗浓度（mol/L) R：气体常数0.008314 L· MPa /（mol · K） T：绝对温度（273+摄氏温度） 材料：小白菜（新鲜叶组和萎蔫叶组） 仪器设备： 注射针头 打孔器 刻度试管（15ml），小试管 试剂：1 M 蔗糖，纯水，甲烯蓝粉 实验步骤 先清洗实验台上试管,防止有残留蔗糖溶液,尽量甩干. 12支大小试管分为两组,每组大小试管各六支;其中一个组员取6支大试管配制0.1-0.6 mol/L的蔗糖溶液10ml(用移液管量取相应体积的蔗糖母液,然后再用另外一支移液管量取相应体积纯水加至10ml).另一组员打叶圆片:新鲜叶和萎蔫叶各60片(每支小试管内放10片用于水势测定). 将大试管中各种浓度蔗糖溶液混匀后,从中量取2ml蔗糖溶液放在小试管中,每个小试管中放10片叶圆片,使叶圆片全部浸没在蔗糖溶液中.放置30分钟进行水分交换,其中需要摇动几次.(利用移液管从低浓度向高浓度量取蔗糖溶液. 4 30分钟后，小试管内叶圆片与蔗糖溶液充分进行水分交换后,用回形针蘸取甲烯蓝少许, 加入小试管中,摇匀. 5 用注射针头吸取各试管中蓝色溶液(针头需事先润洗),将针头插入对应浓度的大试管溶液中部(手要稳),小心挤出液滴,观察蓝色液滴的升降情况(用白纸衬着试管,便于观察),用这种方法观察各试管中小液滴的升降情况.若上升/下降,说明浸过叶圆片的蔗糖溶液浓度变小/变大(组织失水/吸水),表明叶片的水势高于/低于蔗糖溶液的渗透势. 思考题：增加或减少蔗糖溶液中叶圆片数目是否 会影响水势测定结果, 为什么? 拭干叶表水分和泥渍 避开大的叶脉打叶圆片,混合均匀 移液管取溶液和纯水 配制的蔗糖溶液要混匀 润洗移液管和针头（放回原液） 叶圆片浸没溶液中 室温下浸泡30分钟后再染色 尽量少加甲烯蓝 轻压胶管使针筒少量吸入染色溶液 滴入后，停止挤压或放松胶管 * * 植物生理学实验（36学时,2学分） 时间：2009-2010 学年第 2 学期 单周一 6-9节 地点：教学实验中心（室）C1019 逆境胁迫下植物细胞膜透性及脯氨酸含量的变化分析 第17-18周 生长激素作用的空间和浓度效应比较分析、激素检测方法 第15-16周 几种种子活力快速测定方法的比较 第13-14周 种子呼吸对温度的响应 第11-12周 叶绿体色素和光合效率的测定和分析 第9-10周 硝酸还原酶（NR）活性的测定 第7-8周 光和K+ 对气孔运动的调节 第5-6周 环境因素对植物含水量和组织水势的影响 第3-4周 植物生理学实验技术基础 第1-2周 注意事项： 请勿将食品带入实验室； 实验前分组查看器皿； 在老师指导下合理、安全地使用实验器材，爱惜实验仪器； 严禁将任何器皿插入洗液瓶中 实验过程中保持相对安静，不准打闹、嬉戏； 实验后彻底清洗、按实验前摆放器皿； 一旦损坏物品，及时到C1020室邢老师处登记； 每次实验结束后由老师确认各种器皿有否破损后方可离开； 实验结束后由班长安排3-4位同学整体清洁打扫 实验后下周一前由学委交实验报告至C10