济麦22麦麸制备阿魏酰低聚糖及其生理活性研究-食品科学专业论文.docxVIP

1．7本课题的研究内容 1．7本课题的研究内容 1 7 2．材料与方法 ．19 2．1试验材料 19 2．2实验试剂 19 2．3实验仪器 20 2．4技术路线 21 2．5实验方法 ．21 2．5．1小麦麸皮的前处理及工艺流程 ．21 2．5．2木聚糖酶活性的测定 ．21 2．5．3 FOs的制各 ．．23 2．5．4 FOs的测定 ．．23 2．5．5木聚糖酶降解WUP制备FOs的单因素实验 一23 2．5．5．1温度对FOs产量的影响 一23 2．5．5．2 pH对FOs产量的影响 23 2．5．5．3时间对FOs产量的影响 ．．24 2．5．5．4木聚糖酶添加量对FOs产量的影响 ．．24 2．5．5．5底物添加量对FOs产量的影响 ．．24 2．5．6优化试验设计及结果 ．24 2．5．7 FOs抗氧化活性的测定 一24 2．5．7．1 DPPH自由基清除能力的测定 24 2．5．7．2 ABTS自由基清除能力的测定 25 2．5．7．3 FRAP还原能力的测定 25 2．5．7．4羟自由基清除能力的测定 ．．26 2．5．7．5 Fe2+螯合能力的测定 27 2．5．8 FOs抑菌能力的测定 一27 2．5．9 FOs益生能力的测定 ．．28 2．5．10 FOs的分离纯化 29 2．5．11 FOs的结构鉴定 ．30 2．6统计分析 3 1 3结果与分析 32 万方数据 3．1原材料的筛选 3．1原材料的筛选 ．．32 3．2酶解济麦22麦麸制备FOs的工艺优化 ．．33 3．2．1不同酶解温度对制备FOs的影响 ．33 3．2．2不同pH对制备FOs的影响 。34 3．2．3不同酶解时间对制备FOs的影响 ．34 3．2．4不同加酶量对制备FOs的影响 ．35 3．2．5不同底物添加量对制备FOs的影响 ．36 3．2．6酶解条件优化结果 ．36 3．2．7二次拟合响应面的分析 ．39 3．2．8最佳工艺条件的确定及验证实验 ．．40 3．2．9酶解工艺优化的结果与分析 ．41 3．3 FOs抗氧化能力的测定 ．41 3．3．1 ABTS、DPPH及FRAP还原能力的测定 41 3．3．2羟自由基清除能力的测定 ．42 3．3．3 Fe2+螯合能力的测定 ．．43 3．4 FOs抑菌能力的测定 。43 3．4．1抑菌圈直径的测定 ．43 3．4．2最小抑菌浓度的测定 ．44 3．5 FOs益生能力的测定 ．45 3．5．1 FOs对乳酸杆菌的增殖作用 ．．45 3．5．2 FOs对植物乳杆菌的增值作用 ．．45 3．5．3 FOs对弯曲乳杆菌的增值作用 。46 3．5．4 FOs对干酪乳杆菌的增值作用 ～47 3．5．5 FOs对乳酸链球菌的增值作用 ： ．．48 3．6 FOs的分离纯化及结构鉴定 ．48 3．6．1 FOs经Amberlite XAD．2树脂纯化动态解析图 ．．48 3．6．2 FOs经Sephadex LH．20树脂纯化动态解析图 49 3．6．3 HPLC分析 ．50 3．6．4 HPLC．MS分析鉴定 51 4．讨论 54 万方数据 4．1 4．1 FOs的结构分析 ．54 4．2 FOs的抗氧化活性分析 ．54 4．3 FOs的吸收与代谢 ．55 4．4 FOs的功效 ，56 5．结论 58 参考文献 59 致谢 ．．70 攻读学位期间发表论文及研究成果 ．．7l 附录 72 万方数据 山东农业大学硕士学位论文中文摘要 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 济麦22具有高产、抗病与广适性的优良特性，种植面积广，其加工副产物麸皮主要 用作饲料等，经济价值较低。本研究以济麦22麦麸为研究对象，提取麦麸中活性物质阿 魏酰低聚糖并对其生理活性进行初步研究，为其在保健食品、制药及化妆品等应用提供 理论参考，为济麦22的综合开发与利用提供理论依据。 1．本研究选取6种不同原材料的麸皮，分析了其木聚糖酶水解液的抗氧化能力。研 究发现，济麦22麦麸酶解液的ABTS、DPPH清除率的IC50最低。因此，选取济麦22 作为进一步研究的对象。 2．以济麦22的麦麸水不溶性多糖为原料，对木聚糖酶水解麦麸提取阿魏酰低聚糖的 工艺进行了研究。最佳工艺条件为：温度43．78℃，pH 5．1，反应时间44．62 h，加酶量 4．86 g／L。底物添加量87 g／L，实验测得阿魏酰低聚糖浓度为1．326士0．020 mmol／L。 3．采用清除DPPH、ABTS、羟基自由基能力和FRAP还原能力等方法，测定了阿魏 酰低聚糖的体外抗氧化活性，结果表明，阿魏酰低聚糖有较强的抗氧化活性，抗氧化效 果高于阿魏酸。 4．通过测定阿魏酰低聚糖对食品常见菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度。结果表明， 阿魏酰低聚糖对金黄色葡萄球菌、枯