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课件:第九章革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌鉴定.pptx
微生物学检验2019-第九章 革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌鉴定返回总目录-第一节 革兰阳性无芽胞杆菌第二节 革兰阳性需氧芽胞杆菌属12本 章 内 容-学习目标及重点学习目标: 1.掌握:白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌和产单核李斯特菌的生物学特性及临床意义。2.熟悉:白喉棒状杆菌异染颗粒的染色方法和鉴定;炭疽芽胞杆菌与蜡样芽胞杆菌的鉴别。3.了解:红斑丹毒丝菌的特点,与其他细菌的区别。本章重点: ★白喉棒状杆菌鉴定要点。 ★炭疽芽胞杆菌的致病特点及鉴定要点 ★产单核李斯特菌的生物学特性-第一节 革兰阳性无芽胞杆菌革兰阳性无芽胞杆菌 主要包括棒状杆菌属(Corynebacterium)中的白喉棒状杆菌,李斯特菌属(Listeria)中产单核李斯特菌,丹毒丝菌属(Erysipelothrix)中红斑丹毒丝菌-亚碲酸盐血平板上菌落第一节 革兰阳性无芽胞杆菌一、白喉棒状杆菌(一)生物学特性1.形态与染色:G+,菌体细长弯曲 ,栅栏状,异染颗粒2.培养特性含有凝固血清的吕氏培养基(Loeffler medium):细小、灰白色湿润、圆形突起的菌落含有亚碲酸钾血琼脂平板:黑色菌落-β棒状噬菌体(产生外毒素)无毒株第一节 革兰阳性无芽胞杆菌溶原性细菌一、白喉棒状杆菌3.变异: 白喉棒状杆菌形态、菌落和毒性均可发生变异4.生化反应触酶硝酸盐还原氧化酶尿素分解吲哚试验葡萄糖麦芽糖++---++5.抵抗力:对干燥、寒冷和日光的抵抗力较其他无芽胞细菌强。在衣物、床单、儿童玩具等各种物品中生存数日至数周。在干燥的假膜中能存在3个月以上。-咽拭标本第一节 革兰阳性无芽胞杆菌 直接涂片 革兰染色异染颗粒染色亚碲酸钾 血平板 吕氏血清斜面血平板观察菌落特征一、白喉棒状杆菌(二) 微生物学检验1. 检验程序 直接涂片 革兰染色异染颗粒染色生化反应毒力试验涂片染色镜检结果报告-第一节 革兰阳性无芽胞杆菌一、白喉棒状杆菌2. 标本:咽拭子取分泌物。不能及时检验时,可将标本浸于生理盐水或15%甘油盐水中保存3.鉴定(1)标本直接涂片 革兰染色:观察形态、染色性 异染颗粒染色:观察异染颗粒(2)分离培养 吕氏斜面:生长迅速,涂片镜检异染颗粒明显 亚碲酸钾血平板:黑色菌落-第一节 革兰阳性无芽胞杆菌一、白喉棒状杆菌(3)毒力测定1)体外法:可用Elek’s琼脂扩散法、SPA协同凝集、对流电泳等检测外毒素2)体内法:用实验动物(豚鼠、家兔)体内毒力测定(毒素-抗毒素中和试验)Elek平板-鼻、咽黏膜繁殖(产毒)第一节 革兰阳性无芽胞杆菌炎性细胞假膜假膜白喉杆菌一、白喉棒状杆菌(三) 临床意义1. 致病因子:外毒素2. 所致疾病:白喉,急性呼吸道传染病,乙类传染病坏死组织脱落堵塞呼吸道 窒息白喉病人毒素入血:全身中毒、心肌炎等3.治疗:可选用青霉素等-第一节 革兰阳性无芽胞杆菌二、产单核李斯特菌李斯特菌属包括产单核李斯特菌(L.monocytogenes) 此菌对人致病绵羊李斯特菌(L.ivanovii)英诺克李斯特菌(L.innocua)威尔斯李斯特菌(L.welshimeri)西尔李斯特菌(L.seeligeri)格氏李斯特菌(L.grayi)默氏李斯特菌(L.murrayi) -第一节 革兰阳性无芽胞杆菌二、产单核李斯特菌(一) 生物学特性1.形态与染色 G+球杆菌, 20~25℃形成周鞭毛,37℃时鞭毛很少或无;无芽胞2.培养特性 兼性厌氧菌、3~45℃均能生长(4℃冷增菌),最适30~37℃营养要求不高,在含血液、血清、腹水的培养基生长更好。耐盐(200g/LNaCl)。血琼脂平板:形成较小、圆形、光滑而有狭窄β溶血环的菌落产单核李斯特菌血平板上菌落-第一节 革兰阳性无芽胞杆菌二、产单核李斯特菌3. 生化反应:触酶试验(+)、氧化酶(-)、CAMP(+)、葡萄糖(+) 、麦芽糖(+) 、果糖(+);VP (+)、MR (+)、七叶苷(+)4.抵抗力:耐盐、耐碱、、耐冷、不耐酸;对氨苄青霉素,青霉素、链霉素、红霉素等敏感,对杆菌肽、多黏菌素耐药-第一节 革兰阳性无芽胞杆菌二、产单核李斯特菌(二)微生物学检验1.标本:血液、脑脊液、分泌物及病变组织2.染色:G+球杆菌(细胞内、外)3.分离培养:血液琼脂、5%-10%CO2 、35℃4 .诊断要点:G+球杆菌、(湿片)翻筋斗样运动、触酶阳性、七叶苷阳性、葡萄糖(+)、MR (+)、 VP(+)-第一节 革兰阳性无芽胞杆菌二、产单核李斯特菌(三) 临床意义1.传播途径:粪-口传播;垂直感染2.致病物质:溶血素O、磷脂酰肌醇-特异性磷脂酶C(PI-PLC)3.所致疾病:可引起食物中毒,病死率高达30%— 70% 该病的临床表现,健康成人个体出现轻微类似流感症状,新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼吸急促
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