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实训四微生物细胞十数计数.ppt免费

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实训四微生物细胞十数计数

微生物与发酵工艺 实训四 微生物细胞数的计数 使用血球计数板计数单细胞微生物的数量。 二、实验原理 三、实验材料和用具 四、实验方法 四、实验方法 3.样品浓度要求每小格内有5~10个菌体为宜。 4.计数时,用16×25的计数板要按对角线方位,取左上、左下、右上,右下四个中方格(即100小格)计数酵母菌液,用25×16的计数板,除计数上述对角线的四个方格外,还需数中央一个方格的酵母菌数(即80小格)。 四、实验方法 5.每个样品重复计数2~3次,取其平均值,按上述公式计算每毫升菌液所含的酵母细胞数。 6.计数完毕,将计数板在水龙头上冲洗,切勿用硬物洗刷,自行晾干或吹风机吹干,或用擦镜头纸轻轻擦拭。 使用血球计数板对样品酵母菌液进行计数,并计算菌液浓度。 将微生物计数的结果填入下列空白 1.第一次计数的酵母细胞数目= 个。 2.第二次计数的酵母细胞数目= 个。 3.从两次的计数结果中求出酵母细胞的平均数目 4.稀释倍数= 倍。 5.求出每毫升酵母菌液中的细胞数= 个。 七、思考题 1.为什么两种不同规格的血球计数板测定同一样品时,其结果是一样的? 2.使用细胞计数板应注意什么问题? * * 一、实验目的 血球计数板是一块比普通载玻片厚的特制玻片制成。玻片中央刻有四条槽,中央两条槽之间的平面比其它平面略低,中央有一小槽,槽的两边的平面上各刻有9个大方格。中间的一个大方格为计数室,它的长、宽各为1mm,深度为0.1mm,容积为0.1mm3。计数室有两种规格,一种是把大方格分成16个中格,每一中格分成25小格,共计400小格;另一种规格是把大方格分成25中格,每一中格分成16小格,总共也是400小格。 血细胞计数板正面、侧面与正面方格放大示意图 因此,在计算上可按下列两种公式进行: 1. 16×25计数板的计算: 细胞数/mL= (100小格内的细胞数/100)×400 ×10000 ×稀释倍数 2. 25X16计数板的计算: 细胞数/mL= (80小格内的细胞数/80)×400 ×10000 ×稀释倍数 式中,400为计数板的小格总数; 10000为由计数室0.1mm3换算成lmL体积的系数 二、实验原理 1.材料 酵母菌悬液 2.用具 显微镜、血球计数板 1.取清洁干燥的血球计数板,在计数室上面加盖玻片。在显微镜下找到计数室。 2.取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多)。菌液可自行渗入计数室。计数室不得有气泡,然后置高倍镜下计数。 五、实验内容 六、实验报告 * * * * *

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