第4章-微生物的营养和培养基.ppt

（二）4种方法 生态模拟 参阅文献 精心设计 实验比较 沉淀 琼脂胶体强度的破坏 褐色物质的形成 pH发生变化 高压蒸汽灭菌 一般培养基，含糖培养基 过滤灭菌 分别灭菌 间歇灭菌 器皿的灭菌和无菌室的消毒 （一）按培养基成分分类 （二）按培养基外观的物理状态分类 （三）按培养基对微生物的功能分类 （四）其它分类 1、天然培养基 用天然成分（动、植物，微生物体）制成的培养基 优点：营养丰富、价格低廉 缺点：成分不清楚、不稳定 适于：菌种培养、发酵生产 牛肉膏蛋白胨、麦芽汁培养基 2、组合培养基（合成培养基） 高纯度化学试剂配制的培养基 优点：成分精确、重现性高 缺点：价格较高、微生物生长一般 适于：生理、生化、代谢、菌种鉴定研究等 高氏一号培养基、察氏培养基 3、半组合培养基 化学试剂 + 天然成分 实际应用过程中大多数为半组合培养基 马铃薯蔗糖培养基 根据微生物类群来分 四种菌的实验室常用培养基 （1） 牛肉膏蛋白胨培养基------细菌 牛肉膏 5g ，氯化纳 5g，蛋白胨 10g，水 1000ml，pH7.2-7.4 （2） 高氏一号培养基-------放线菌 可溶性淀粉 20g，KNO3 1g，K2HPO4 0.5g ，NaCl 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO4 0.01g ，水1000ml pH7.2-7.4 （3） 麦芽汁培养基---------酵母菌 干麦粉加4倍水，在60度保温3～4h，用碘液试验至糖化完全为止，调糖度为100巴林，煮沸过滤，pH5-6.0 （4） 察氏培养基------------霉菌 NaNO3 3g，FeSO4 0.01g ，K2HPO4 Ig，KCl 0.5g ，MgSO4.7H2O 0.5g，蔗糖 30g ，H2O 1000ml ，pH5--6 1．固体培养基：外观呈固态的培养基 （1）天然固体培养基：天然固体状基质直接制成的培养基。如，麸皮、米糠、稻草粉配制的真菌培养基； （2）非可逆性固体培养基：由血清凝固成或无机硅胶配制的培养基。适合于分离自养型微生物。 （3）凝固培养基：液体培养基中加入1-2%琼脂或5-12%明胶作凝固剂，加热融化，冷却后凝固。 （二）按培养基外观的物理状态分类 凝固剂------琼脂的特点 a) 不被微生物液化分解和利用； b)?在微生物的生长温度范围内能保持固体状态； c)?凝固点的温度对微生物无害； d)??不会因培养基灭菌而被破坏； e)??透明度好，粘着力强； f)???配制方便、价格低。 琼脂------其熔点96℃，凝固点40℃ 明胶-------熔点28--35℃，凝固固体培养基为微生物提供了一个营养表面，可以形成单个菌落，在微生物的分离、鉴定、计数、保藏等方面起重要作用。 （4）滤膜 2．半固体培养基： 一般用0.2%--0.7%琼脂作凝固剂 用作观察细菌的运动特征、噬菌体效价、各种厌氧菌的培养及菌种保藏等。 3．液体培养基： 不含任何凝固剂，它常用于大规模的工业生产及实验室进行微生物生理代谢等研究。 4、脱水培养基 干燥培养基 使用时加入适量水、灭菌即可 使用方便 1.基础培养基 含有一般微生物生长所需的基本营养成分；也可以作为一些特殊培养基的基础成分 2.选择性培养基： 就是根据某种或某一类微生物的特殊营养需要或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。 利用这种培养基可以将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。 （三）按培养基对微生物的功能分类 加富性选择培养基-------投其所好，形成优势，使原先极少量的筛选对象很快在数量上接近或超过原试样中其他占优势的微生物，富集和增殖。 抑制性选择培养基--------抑制其它菌生长 两者功能叠加使用，利用其对某种制菌微生物的抗性，使原试样中敏感菌死亡 纤维素培养基、无氮培养基。 3.鉴别培养基： 可以用于鉴别某种或某一类微生物的培养基。 一般通过加入某些试剂，使得某种或某类微生物的菌落发生颜色变化，肉眼从近似菌落中找出目的菌落的培养基，便于区别。 例如：伊红美蓝乳糖培养基 EMB， 用于饮用水、牛奶中的大肠菌群的细菌学检验 蛋白胨 10g，乳糖 5g，蔗糖5g，K2HPO4 2g，伊红Y 0.4g，美蓝0.065g，蒸馏水1000ml，pH7.2 EMB培养基 伊红 美蓝------苯胺染料，抑制G+菌和一些难培养的G－细菌。 低酸下----两种染料结合，作产酸指示剂作用，大肠杆菌分解乳糖产大量混合酸，菌表面带H＋，菌落深紫色、菌落表面有绿色金属光泽； 其它几种产酸力弱的肠道菌呈棕色， 因此为鉴别培养基，也具有选择革兰氏阴性菌的作用。 试样