白桦BpTCP7基因启动子的克隆及表达分析-南京林业大学学报.PDF

第４３卷　 第 １期 南京林业大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．４３，Ｎｏ．１ ２０１９年１月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ （Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｊａｎ．，２０１９ － ＤＯＩ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００ ２００６ 白桦ＢｐＴＣＰ７基因启动子的克隆及表达分析 任　 丽，董京祥，杨　 洋，黄海娇，李慧玉∗ （东北林业大学，林木遗传育种国家重点实验室，黑龙江　 哈尔滨　 １５００４０） 摘要：【目的】研究ＢｐＴＣＰ７ 启动子的表达模式，为深入分析ＢｐＴＣＰ７ 基因功能提供一定参考。 【方法】克隆了 ＢｐＴＣＰ７基因上游１７９１ｂｐ启动子序列，通过ＰＬＡＣＥ和Ｐｌａｎｔ ＣＡＲＥ 网址对顺式作用元件进行分析，然后转入拟 南芥，并分析ＢｐＴＣＰ７启动子的组织表达特性及盐、旱胁迫应答反应。 【结果】ＢｐＴＣＰ７启动子序列中含有与细胞 周期、开花、叶片发育、激素及胁迫响应等相关的顺式作用元件。 该启动子在拟南芥中的表达模式呈现为营养生 长阶段和生殖生长阶段均有表达，且在叶片中表达明显，与此同时，ＢｐＴＣＰ７启动子在幼嫩、成熟叶片的边缘均有 表达。 与对照相比，ＮａＣｌ、ＰＥＧ胁迫诱导处理后ＢｐＴＣＰ７基因表达量有升高的现象。 【结论】ＢｐＴＣＰ７ 基因参与白 桦的叶片发育、激素应答、胁迫响应（盐、干旱）等生物学过程，对营养、生殖生长阶段各组织器官的发育也有一 定的调控作用。 关键词：白桦；ＢｐＴＣＰ７启动子；顺式作用元件；克隆；表达分析 － － － 中图分类号：Ｓ７２２　 　 　 　 　 　 　 文献标志码：Ａ 文章编号：１０００ ２００６（２０１９）０１ ００３２ ０７ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆＢｐＴＣＰ７ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｆｒｏｍＢｅｔｕｌａｐｌａｔｙｐｈｙｌｌａ ＲＥＮ Ｌｉ，ＤＯＮＧＪｉｎｇｘｉａｎｇ，ＹＡＮＧ Ｙａｎｇ，ＨＵＡＮＧ Ｈａｉｊｉａｏ，ＬＩ Ｈｕｉｙｕ∗ （Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒｅｅ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｉｍｐｏｒｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ １５００４０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】ＢｐＴＣＰ７ ｇｅｎｅ，ａ ｍｅｍｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ＣＩＮ ｂｒａｎｃｈ ｏｆ ＴＣＰ ｆａｍｉｌｙ，ｐｌａｙｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ． Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ ｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＢｐＴＣＰ７． 【Ｍｅｔｈｏｄ】 Ａ １７９１ｂｐｆｌａｎｋｉｎｇ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｕｐ⁃ ｓｔｒｅａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ｃｏｄｏｎｗａｓｃｌｏｎｅｄ，ａｎｄｐｕｔａｔｉｖｅ ｃｉｓ⁃ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔｓｗｅｒｅ ｄｅｃｉｐｈｅｒｅｄｆｒｏｍｔｈｅｐｒｏ⁃ ｍｏｔｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ＢｐＴＣＰ７ ｕｓｉｎｇ ＰＬＡＣＥ ａｎｄ Ｐｌａｎｔ ＣＡＲＥ ｗｅｂ ｔｏｏｌｓ，ａｎｄ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ ｉｎｔｏＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ． Ｔｈｅｎ， ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｄｕｒｉｎｇ ｓａｌｔ ａｎｄ ｄｒｏｕｇｈｔ ｓｔ