百合热激转录因子基因LlHSF1的克隆与表达分析.PDF

园 艺 学 报 2012 ，39 （11）：2199 –2205 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 百合热激转录因子基因 LlHSF1 的克隆与表达 分析 易 瑾，罗 弦，曹 兴，陈 莉，辛海波，李晓昕，陈 进，义鸣放* （中国农业大学观赏园艺与园林系，北京 100193 ） 摘 要：以铁炮百合（Lilium longiforum ）‘白天堂’的组培苗叶片为试材，通过RACE 方法得到了一 个热激转录因子（heat shock transcription factor ，HSF ）基因LlHSF1 的cDNA 全长序列。该序列全长 1 068 bp ，推断其含有一个 780 bp 的开放阅读框（ORF ），编码 260 个氨基酸，推导的蛋白质分子量为 30.123 kD 。 对推定的氨基酸序列与其它已知物种 HSF 进行比对发现，该基因有热激转录因子所具备的典型结构域和 调控元件，据此推断，克隆到的基因是一个新的热激转录因子成员，命名为 LlHSF1 。荧光定量PCR 分析 结果表明：常温下该基因在百合根、鳞茎、叶中都有表达，但在叶片中表达量较高；实时荧光定量 PCR 分析结果表明，42 ℃处理 1 ~ 12 h，叶中该基因表达量增加。 关键词：百合；铁炮百合；热激转录因子；克隆；表达；荧光定量 RT-PCR 中图分类号：S 682.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2012 ）11-2199-07 Cloning and Expression Analysis of LlHSF1 from Lilium longiforum * YI Jin ，LUO Xian ，CAO Xing，CHEN Li，XIN Hai-bo ，LI Xiao-xin ，CHEN Jin，and YI Ming-fang （Department of Ornamental Horticulture and Landscape Architecture ，China Agricultural University，Beijing 100193， China） Abstract ：A full length cDNA named LlHSF1 ，belonging to Heat shock transcription factor （HSF ）， was cloned from Lilium longiforum ‘White Heaven ’by RT-PCR and RACE （rapid amplification of cDNA ends ）. The gene consisted of 1 068 bp and open reading frame encompassed 780 bp encoding a polypeptide of 260 amino acids with calculated protein molecular mass of 30.123 kD. Cluster analysis showed that this gene was highly homologous to known HSF from other organisms. RT-PCR analysis showed that expression of LlHSF1 could be detected in leaf ，root and bulb at 22 ℃，and it was expressed highly in the