高考生物基因工专题复习超全.pptVIP

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高考生物基因工专题复习超全

* 目的基因与运载体结合的结果可能有几种情况? 1、目的基因与目的基因结合; 2、质粒与质粒结合; 3、目的基因与质粒结合。 高考总复习·生物 思考 5、目的基因与运载体结合 常用的受体细胞: 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 三、将目的基因导入受体细胞—转化 1、将目的基因导入植物细胞 (1)农杆菌转化法 特点: 能感染双子叶植物和祼子植物,对单子叶植物无感染能力 Ti质粒的T—DNA可转移至受体细胞并整合到其染色体上 转化过程: Ti质粒 目的基因 构建 表达载体 导入 植物细胞 插入 植物细胞染色DNA 表达 新性状 转入 农杆菌 (2)基因枪法 基因枪法又称微弹轰击法,是利用压缩气体产生的动力,将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中,使目的基因与其整合并表达的方法。 (3)花粉通道法 植物花粉在柱头上萌发后,花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后,花粉形成的花粉管还未愈合前,剪去柱头,然后,滴加DNA(含目的基因),使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。 2、将目的基因导入动物细胞 方法: 显微注射技术 操作程序: 提纯含目的基因表达载体 取受精卵 显微注射 移植到子宫 受精卵发育 新性状动物 3、将目的基因导入微生物细胞 常用法:Ca2+处理 常用菌:大肠杆菌 微生物作受体细胞原因: 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 过程: Ca2+处理大肠杆菌 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA 受体细胞 受体细胞的种类:动物,植物细胞,微生物。 基因工程的目的不同,可选择的受体细胞不同。若生产基因工程药品,受体细胞一般选用微生物,利用微生物繁殖速度快的特点,可在短期内获得大量产品。若培养转基因动物,则选用受精卵。 受体细胞的选择: 四、目的基因的检测与鉴定 检测 ①导入检测:目的基因是否导入受体细胞 方法—— DNA分子杂交 ②表达检测 转录检测——分子杂交 翻译检测——抗原抗体杂交 分子检测法 鉴定 抗虫鉴定 抗病鉴定 活性鉴定等 个体水平的鉴定 (四)目的基因的检测与鉴定 ——检查是否成功 检测— 鉴定—— ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 方法—— 方法—— 方法—— DNA分子杂交 分子杂交(注意与上不同之处) 抗原抗体杂交 知识延伸——DNA分子杂交技术 该方法是根据碱基互补配对原则,把互补的双链DNA解开,把单股的DNA小片段用同位素、荧光分子或化学发光催化剂等进行标记,之后同被检测的DNA中的同源互补序列杂交,从而检出所要查明的DNA或基因。 DNA 附着在膜上 硝化纤维素 加探针 报告基因(含荧光素分子) 变性 DNA杂交 (如检测SARS病毒等) a b c d 基因工程的基本操作流程图 反转录 基因工程的应用 抗病  抗逆  生长速度 品质 药物 器官移植 将 基因与 等调控组件重组在一起,通过 等方法,导入哺乳动物的 中,将 其 送入母体,使其发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁生产所需要的药品,称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。 乳腺生物反应器 乳腺生物反应器的优点:①产量高;②质量好;③成本低;④易提取。 药物蛋白 乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵 1、基因治疗概念: 基因治疗 把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,是治疗遗传病的最有效的手段。 (把特定的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,从而达到治疗疾病的目的) 2、实例: 将腺苷酸脱氨酶基因转入取自患者的淋巴细胞中,再将这种淋巴细胞转入患者体内。 对严重复合型免疫缺陷症的治疗 3、原理 病人细胞中既含有缺陷基因,又含有通过基因工程导入的正常基因,在病人体内两种基因都存在且都能表达,正常基因的表达产物掩盖了缺陷基因的表达产物,从而治愈了有基因缺陷的疾病。 4、基因治疗的类型 体外基因治疗:先从病人体内获得某种细胞,进行培养,然后在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内。 体内基因治疗:直接向人体组织细胞中转移的治病方法。(如将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者肺组织) 5、基因治疗的发展现状:处于初期的临床试验阶段 基因诊断 1、概念 用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分

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