罗非鱼海豚链球菌疫苗的研制及免疫效果的初步研究预防兽医学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 广西大学硕士论文 广西大学硕士论文 罗非鱼海豚链球菌疫苗的研制及免疫效果的初步研究 罗非鱼海豚链球菌疫苗的研制及免疫效果的初步研究 摘要 海豚链球菌(Streptococcus iniae)病是水生动物的一种重要细菌性 疾病，可感染多种海水和淡水鱼类，在世晃许多国家均有该病的暴发和 流行，对渔业生产造成巨大危害。该病主要集中在地中海、中亚、东南 亚和澳大利亚等地区，近年来我国海豚链球菌病暴发呈上升趋势。海豚 链球菌不仅是引起鱼类链球菌病的主要病原，而且对食品安全和人类健 康构成了威胁，该菌可引发人类蜂窝织炎、心内膜炎、关节炎、脑膜炎、 脊髓炎等。该病目前主要靠用化学药物进行防治，但化学疗法有很多弊 端，相比而言疫苗接种对养殖环境和人类健康是安全的，因此被认为是 防治细菌性疾病的最重要的方法之一。目前国外已有很多学者已开展了 海豚链球菌疫苗的研究和探索并取得了一定成效，但国内尚未见疫苗研 究的相关报道。 广西是罗非鱼养殖的主要地区之一，鱼类链球菌病造成的经济损失 和随之带来的药物残留及环境污染已严重影响广西罗非鱼养殖业的健康 发展。本研究从广西各地发病的罗非鱼体内分离出了9株链球菌，采用传 统方法和分子生物学方法相结合的手段对分离的致病性菌株进行了详细 鉴定，最终确定8株为为海豚链球菌，证明海豚链球菌是广西罗非鱼链球 菌病的主要病原；选取3株具有区域代表性的菌株对罗非鱼先后进行不同 广西大学硕士论文 广西大学硕士论文 罗非鱼海豚链球菌疫苗的研制及免疫效果的初步研究 剂量的两次攻毒试验，选择具有较好免疫原性和交叉免疫保护力的菌株 做为疫苗候选菌株，并采用福尔马林常规灭活的方法制备了灭活疫苗。 本研究对研制的灭活疫苗进行了罗非鱼免疫后的免疫应答和保护效果的 初步研究。通过不同免疫途径(注射、浸泡、口服)和免疫剂量对罗非 鱼进行免疫效果试验；并在免疫前和免疫后的不同时间里对试验鱼进行 尾静脉采血，通过测定血液中白细胞的数量、各类白细胞的含量及其吞 噬活性，血清的抗菌活力、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活力及抗体水 平。实验证明经过疫苗免疫的罗非鱼对致病性海豚链球菌的抵抗力明显 增强，具有很高的相对保护率，注射组的相对保护率高达90％以上；研 究结果还表明，疫苗免疫后白细胞总数、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单 核细胞数量均显著高于对照组(P0．05)，血细胞的吞噬活性明显增强。 血清的抗菌活力、溶菌酶活性和抗体水平与对照组差异显著(PO．05)， 其中注射免疫组罗非鱼的免疫能力提高最明显，浸泡和口服免疫的罗非 鱼其免疫能力也有不同程度的提高。研究结果证明本研究制备的罗非鱼 海豚链球菌疫苗是有效的，可以通过合适的免疫途径对罗非鱼进行免疫 接种海豚链球菌疫苗来预防该病的感染和暴发。 本研究还对罗非鱼的血清免疫球蛋白(immunoglobulin)进行了纯 化和初步分析，确定了罗非鱼血清免疫球蛋白的分子量，为罗非鱼免疫 球蛋白结构的进一步研究奠定基础。 关键词：罗非鱼海豚链球菌疫苗免疫应答免疫效果免疫球蛋 白 Ⅱ PREPARATION PREPARATION OF STl冱PTOCOCCUS INIAE VACCINE AND ITS IMMUNOLOGICAL EFFICACY ON TILAPIA ABSTRACT Streptococcus iniae is a significant pathogen of aquatic that has been associated with outbreaks of disease in freshwater and marine fish species in various parts of the world．The diseases caused by S．iniae results in huge harm in fishery，eatable safty，human health．At present chemotherapeutics was the mian means to prevent and cure diseases of S．iniae，but chemotherapeutics could cause much problem．Vaccination is regarded as an ideal strategy．Theiniae vaccine was recently reported in oversea，but that was not reported in china． In this study we had isolated 9 strains of Streptococcus from the samples