9 2013 种子活力测定.pptVIP

不同方法测定种子生活力结果 方法 供试粒数 有生活力种子粒数 无生活力种子粒数 有生活力种子占供试粒数的％ TTC 30 红墨水 30 荧光 30 思考题 1、还有哪些方法、生理过程、生化原理可用来快速鉴定种子的生活力？ 2、试比较这几种方法的测定结果是否相同？为什么？ 每组清洗 6套培养皿（上周实验用的） 6支试管 洗净后用蒸馏水冲洗 下次实验（5月28日） 实验十 细胞（质膜）透性测定 实验九 种子生活力的快速鉴定 ◇种子生活力是指种子发芽、生长的潜在能力或种胚具有的生活能力。 ◇了解种子有无生活力需测定种子的发芽率，但所需时间较长，且无法预知是否处在深休眠状态。 ◇利用化学反应、生理反应与物理方法的快速鉴定法，短时间获得种子是否具有生活力的结果。 ◇本实验学习几种种子生活力的快速鉴定方法。 实验目的 TTC法 红墨水法 荧光观察法 检测种子活力 实验1TTC（氯化三苯基四氮唑）法 实验材料 ：小麦种子 实验试剂：0.5%TTC溶液 实验用具：培养皿，单面刀片，恒温箱 实验步骤1 浸种：待测种子在280C温箱中温水（30-350C）浸种2-6小时，以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。 （已做） 胚 果毛 腹沟  ?　 ? ? ? ? ? ? ? ? 小麦籽粒纵切面图（示胚的结构） A. 籽粒纵切面；B. 胚的纵切面 1. 胚；2. 胚乳；3. 果皮与种皮的愈合层；4. 糊粉层；5. 淀粉贮藏细胞；6. 盾片；7. 胚芽鞘；8. 幼叶；9. 胚芽生长点；10. 胚轴；11. 外胚叶；12. 胚根；13. 胚根鞘 实验步骤2(显色) 取吸涨的小麦种子30粒，每粒沿胚的中心线纵切（使胚部一分为二），分成二份，分别放在两个培养皿中； 取其中一个培养皿（30个半粒），加入0.5%TTC溶液浸没种子，置于35℃温箱中30min。 实验步骤3 倒去TTC溶液，用自来水冲洗种子一次，肉眼观察胚部着色情况； 胚部呈玫瑰红色的种子是有生活力的种子； 胚部呈淡红色的种子，生活力较弱，有的可发芽； 胚部未着色的种子，不能发芽。 统计结果，以百分率表示。 TTC法 注意事项 将胚一分为二； 显色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 显色温度25-350C为宜； 显色结束后，要立即观察，因TTC光下久放会变色。 实验2红墨水染色法 有生活力的种子胚细胞的原生质膜具有选择透性，有选择吸收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染色； 丧失生活力的种子，胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，染料可以自由进出细胞使胚部染色； 根据胚部是否被染色来鉴定种子有无生活力。 实验原理 实验材料：小麦种子实验试剂：5％红墨水实验用具：同TTC法。 实验步骤 1（浸种） 浸种：同TTC法。 实验步骤 2（染色） 取另外一个培养皿中30个半粒小麦种子； 加入红墨水溶液染色10min。 实验步骤 3 10min后，倾去染色液并冲洗，至冲洗液无色为止，检查种子染色情况； 胚根、胚芽、子叶都不着色或仅胚根、胚芽尖端着色而子叶大部分不着色的是活种子；以上三部分全部或大部分着色的是死种子； 统计结果，以百分率表示。 注意事项 染料的浓度要适当，染色时间不能太长，否则不易区别被染色与否。 染色法测定种子生活力，适用于禾谷类、豆类、麻类、瓜类、十字花科、棉花、果树等植物种子。 TTC法 红墨水法 实验3荧光法（直接观察法） 植物种子中存在着许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质，如核酸、蛋白质、黄酮类、酚类、香豆素等物质； 有些种子（尤其是禾本科、松柏科、某些蔷薇科） 在衰老过程中，这些荧光物质结构和成分往往会发生变化，导致荧光丧失或荧光颜色改变； （活种子有蓝紫色荧光，死种子无荧光或荧光呈黄褐色） 具此特点的种子可用“荧光观察法”鉴定种子生活力。 实验原理 有些种子（尤其是十字花科植物） 衰老死亡时，荧光物质性质虽未改变，但由于细胞原生质透性加大，浸种后种子中的荧光物质很容易外渗； 可观察浸种后衰老死亡种子漏出“荧光团”的数量,确定种子生活力。 实验材料：小麦干种子 实验用具：单面刀片，培养皿，紫外分析仪  实验步骤 取小麦干种子15粒，用刀片沿胚的中心线将种子纵切成两半，放在培养皿中，使切面向上，放在紫外分析仪下照射并进行观察； 有生活力的种子产生明亮的蓝色、蓝紫色或蓝绿色的荧光；死种子多半是黄色、褐色以至暗淡无光，并带有斑点； 记录有生活力种子及丧失生活力种子的数量，计算百分率。 紫外分析仪 放入培养皿 观察窗口 30粒湿种子 15粒干种子 30个半粒 TTC法 红墨水法 荧光观察 30个半粒 30个半粒 30min 恒温箱 10min 切面向上