实验室常用血液抗凝剂的特点及应用论文.doc

实验室常用血液抗凝剂的特点及应用 在实验室检验中，有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的。而抗凝剂种类较多，实际应用中要根据不同的需要进行选择，才能获得理想的效果。实验室中常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)、枸橼酸盐、草酸盐等4种，现将它们的特点及应用分别叙述如下: 一、肝素 抗凝是用于血液化学成分检测的首选抗凝剂。肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖，是分散相物质平均分子质量为15000。其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶?结合引起抗凝血酶?构型发生变化，加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。此外，肝素还能借助血浆辅助因子(肝素辅助因子?)来抑制凝血酶。常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐，其中以肝素锂最好，但其价格较贵，钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量，铵盐会增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的剂量为10.0,12.5 IU/ml血液。 肝素对血液成分干扰较少，不影响红细胞体积，不引起溶血，适用于做红细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积及普通生化测定。但肝素具有抗凝血酶作用，不适合做血凝试验。另外，肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少，所以不适合做白细胞分类和血小板计数，更不能用于止血检验。此外，肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因为Wright染色后出现深蓝色背景，影响显微镜减产。肝素抗凝血应于短时间内使用，否则放置过久血液又可凝固。 二、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐) 2+ EDTA能与血液中Ca结合成螯合物，凝血过程被阻断，血液不能发生凝固。EDTA盐有钾、钠、锂盐，国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K，其2溶解度最高，抗凝速度最快。EDTA盐通常配成质量分数是15%的水溶液，每ml血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。EDTA盐可在100?下干燥，抗凝作用不变。 此抗凝剂不影响白细胞计数及大小，对红细胞形态影响最小，并且可以抑制血小板的聚集，适用于一般血液学检测。但如果抗凝剂浓度过高，渗透压上升，会造成细胞皱缩。EDTA溶液pH与盐类关系较大，低pH可使细胞膨胀。EDTA-K可2使红细胞体积轻度膨胀，采血后短时间内平均血小板体积非常不稳定半小时后趋于2+2+稳定。EDTA-K使 Ca、Mg下降，同时使肌酸激酶、碱性磷酸酶降低，EDTA-K22的最佳浓度为1.5mg/ml血液，如果血少，中性粒细胞会肿胀分叶消失，血小板会肿胀、崩解，产生正常血小板的碎片，使分析结果产生错误。EDTA由于能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合，不适于血凝和血小板功能检测，也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。此外，EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子，故不适合制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。 三、枸橼酸盐 2+ 枸橼酸盐主要是枸橼酸钠，其抗凝原理是能与血液中的Ca结合形成螯合物，2+使Ca失去凝血功能，凝血过程被阻断，从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有NaCHO?2HO和2NaCHO?11HO两种晶体，通常用前者配成3.8%或3.2%的3657236572 水溶液，与血液按照1:9体积混合。 大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝，它有助于?因子和?因子的稳定，并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小，可用于血小板功能分析。枸橼酸钠细胞毒性较小，也是输血中血液保养液的成分之一。但是，枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液，碱性强，不适用于血液化验和生化测验。 四、草酸盐 草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根2+2+与标本中的Ca形成草酸钙沉淀，使Ca失去凝血功能，凝血过程被阻断。常用 的草酸盐抗凝剂种类有草酸钠、草酸钾和草酸铵，草酸钠的常用浓度为O.1 mol/L，++与血液按1:9比例使用。但是，高浓度k或Na易使血细胞脱水皱缩，而草酸铵则 可使血细胞膨胀，故测定血细胞比容时用草酸铵与草酸钾或草酸钠两者适当比例混 合的抗凝剂，恰好不影响红细胞的形态和体积。常用于血液生化测定，但不适用于+ 2+K、Ca的测定。由于生成草酸钙沉淀，红细胞会出现锯齿状，白细胞出现空泡， 淋巴细胞及单核细胞会变形，不宜做血片检查。草酸盐可使血小板聚集，并影响白 细胞形态，不能用于白细胞和血小板分类计数。 主要参考文献: 1.徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学[M].第三版.北京:人民卫生出版 社,2002:1243. 2.郭 建,孙葵英,孙 滨,等.抗凝剂选择对全血细胞分析的影响.临床检验杂 志,1998,16(2):311. 3.张 文.临床检验抗凝剂特点及应用.广东医学,2005,26(8):1158-1159. 4.周伟青.抗凝剂在临床检验中的应用.现代中西医结合杂志,2006,15(2 4):3403-3404.