副猪嗜血杆菌分离鉴定及其灭活苗的研制-预防兽医专业论文.docxVIP

;喇喇附则! \， Y1l:SUU苟 I ? 摘要 画lJ 猪嗜血杆菌 (Haemophilus p町邸uis ，HPs)是猪01ωsers病的病原体，猪上呼吸道 的一种共栖筒，它可在特定条件下侵入机体而引起以纤维索性多发性桨膜炎、关节炎 和脑膜炎为特征的全身性疾病. HPs隶属于巳氏德杆菌科 (Pastteurellaceae Pohl ，1981) 嗜血杆菌属( Haemophilus winslow et.al，1917).HPs是一种非溶血性、非运动性、 NAD 依赖型、革兰氏阴性细小杆菌.目前，我国很多省市患病猪群中均可分离获得副猪嗜 点杆菌，该菌已成为保育猪死亡的主要原因之一，给我阁养猪业带来了巨大的经济损 失，但尚无有效的预防和控制措施.为此，本研究对副猪嗜血杆菌的分离鉴定和灭活 疫苗的制作进行研究. 1.副猪嗜血杆菌的分离鉴定:四川某个大型规模化猪场存在疑似副猪嗜血杆菌 病， 50余头仔猪发生多发筑膜炎、关节炎和脑膜炎等.本实验从发病仔猪中选择 9头 症状典型的病死仔猪作为分离对象，从中分离得到 1株细菌，通过细菌形态、培养特 性、生化特性及.PCR鉴定最终确定为副猪嗜血杆菌. 2.品lJ 猪嗜血杆菌灭活疫苗仔猪免疫保护效力研究:病兑付猪的各内脏器官纹碎后 加入适爱生理盐水稀释混匀，用甲酶灭活后制成氢氧化铝肢体灭活疫苗，用制作的组 织氢氧化铝肢体灭活疫苗免疫断奶仔猪，首次免疫后 3用以问样剂量和途径加强免疫 1 次，同时设立空白对照组，第 2次免疫后2周由鼻腔途径攻毒，通过 ELISA抗体检测、 临床症状观察、病理剖检坪价该疫苗免疫效果.结果为，仔猪免疫该苗后无异常临床 表现.以4mL导头免疫剂量首次免疫后第 7天即可检测到 ELISA抗体，首允后 35天 ELISA抗体水平达高峰，首先后 5周可有效保护免疫猪免受同源副猪嗜血杆茵茵株攻 毒发病.结果农明，该疫苗具有良好的安全性和保护效力.通过免疫攻毒保护试验证 实了该研究中制备的副猪嗜血杆菌灭活疫苗具有较好的保护效果，从而为该病的有放 防制奠定了重要基础. 关键词:昌1]猪嗜血杆菌;分离鉴定;又活疫苗 II II Isolation and identification of Haemophilus parasuis and preparation of inactivited vaccine Shouqin Sun(Preventive Veterinary) Directed by Wang ηn Abstract Haemophilus parasusis is a member of 性le fami1y Pasteurellaceae and commensa1 organism of the upper respiratory 位act of conventional pigs.Under appropriate conditions it can invade and cause severe systemic disease，characterized by fibrinous polyserositis ，arthritis and meningitis. Haemophilus parasusis is a non-moti1e，nicotinamide adenine dinucleotide (NAD)-dependent ，Gram-negative bacterium. Currently ，H.parasuis infections is one of 出e important disωes，which produces significant mortality and morbidity in piglets ，causing an important economic losses in pig industry in China.However ，there isnt an effective wayωprevent and control the outbreaks of this disease. l .Isolation and identification of Haemophilus par出uis: There is suspected Haemophilus parasuis disease in one of the large-sca1e pig farms in Sichuan.More than 50 piglets occ山s polyserositis ，polyarthri