低剂量吡格列酮通过非PPARγ依赖途径保护创伤性脑损伤-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 英文全称 中文全称 bp Base pairs 碱基对 cDNA Complementary Deoxynucleic acid 互补脱氧核糖核酸 DAB 3,3’-diaminobenzidine 二氨基联苯胺 DEPC Diethyl pyrocarbonate 焦碳酸二乙酯 DNA Deoxynucleic acid 脱氧核糖核酸 DMSO Dimethylsulfoxide 二甲基亚砜 FP Forward Primer 上游引物 H202 Hydrogen peroxide 过氧化氢 HE Hematoxylin-eosin staining 苏木精—伊红染色 IL-6 Interleukin-6 白介素-6 mRNA Messenger RNA 信使 RNA NISSL Nissl body 尼氏体 PBS Phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲液 Pio Pioglitazone 吡格列酮 PPAR Peroxisome proliferator activated receptor 氧 化 物 酶 体 增 殖 物 激活受体 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链式反应 RNA Ribonucleic acid 核糖核酸 RP Reverse Primer 下游引物 SD Sprague Dawley 斯泼累格·多雷 TBI Traumatic Brain Injury 创伤性脑损伤 Tris Trishydroxymethyl aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 TNF-α Tumor necrosis factor- α 肿瘤坏死因子-α TZDs Thiazolidinediones 噻唑烷二酮类 1 低剂量吡格列酮通过非 PPARγ 依赖途径保护创伤性脑 损伤 摘要 目的：通过观察大脑皮层细胞损伤、尼氏体脱失、细胞凋亡及测 定大脑皮层IL6、TNFα、PPARγ mRNA的表达情况，探讨低剂量吡格列 酮是否通过非PPARγ依赖途径对创伤性脑损伤发挥神经保护作用。 方法：将30只6周龄SD雄性大鼠随机分为假手术组、TBI组、PPARγ 拮抗剂T0070907 1.0 mg.kg-1组、低剂量Pio 1.0mg.kg-1组、T0070907 1.0 mg.kg-1+ Pio 1.0 mg.kg-1组、大剂量Pio10 mg.kg-1组，除假手术组外均作 Feeney自由落体重物锤打击。采用HE染色、Nissl染色及Tunel染色观察 实验大鼠脑组织细胞损伤、尼氏体脱失及神经细胞凋亡程度,用定量 PCR技术检测IL6、TNFα、 PPARγ mRNA表达水平。 结果：(1) 低剂量吡格列酮能减轻创伤性脑损伤后细胞损伤，Pio1.0 组、Pio10.0组细胞损伤率低于T0070907组和TBI组(P0.05), Pio1.0组与 Pio10.0组细胞损伤率无明显统计学差异(P0.05); (2) 低剂量吡格列酮 能减轻创伤性脑损伤后尼氏体脱失, Pio1.0组, Pio10.0组尼氏体脱失率 注：本研究受重庆市卫生局科技基金(渝教科文 2010-5)支持 2 低于T0070907组和TBI组(P0.05), Pio1.0组与Pio10.0组尼氏体脱失率 无明显统计学差异(P0.05)；(3) 低剂量吡格列酮能减轻创伤性脑损伤 后细胞凋亡，Pio1.0组、Pio10.0组凋亡细胞数少于T0070907组和TBI组 (P0.05), Pio1.0组与Pio10.0组凋亡细胞数无明显统计学差异(P0.05)； (4) IL6 mRNA表达水平在TBI后24h最高，与48h、72h及正常组比较有统 计学差异(P0.05)；而低剂量吡格列酮能减少IL6 mRNA表达，与大剂 量吡格列酮组比较无统计学差异(P0.05), 明显低于TBI组(P0.05); (5) TNFα mRNA表达水平在TBI后24h和48h最高，与72h及正常组比较有统 计学差异(P0.05)；而低剂量吡格列酮能减少IL6 mRNA表达，与大剂 量吡格列酮组比较无统计学差异(P0.05), 明显低于TBI组(P0.05); (6) 大剂量Pio10.0组PPARγ mRNA表达最多，与低剂量Pio1.0组有统计学差 异(P0.05)。 结论：低剂量吡格列酮可以通过非 PPARγ 依赖途径保护创伤性脑 损伤导致的神经损害和炎症反应。 关键词：吡格列酮，创伤性脑损伤， 非 PPARγ 依赖途径，神经 保护，炎症因子 3 LOW-DOSE PIOGLITAZONE PROTECTS TRAUMAT