梗阻性黄疸时血红素氧化酶-1表达及一氧化碳变化的研究-外科学专业论文.docxVIP

摘要 目的z 通过研究梗阻性黄 瘟大 鼠肝脏、心脏、肺脏中血红素氧化酶 -lmRNA CHO-lmRNA) 表达，测定大鼠血浆中 一氧化碳 (CO) 含量F 同时研究梗阻性黄 瘟患者肝脏中 HO-lmRl斗A 表达，探讨梗阻性黄瘟时 HO-l 及其产物 CO 变化的机 理，以及 HO-l 和 co 对梗阻性黄瘟患者受损肝脏功能的保护作用 。 材料与方法= 1.标本来源 动物标本:健康雄性 Wistar 大鼠 48 只，体重 260-300g ，随机等分成4 组，假 手术对照组 CCG) ，梗阻性黄瘟7d 组 C7d)、梗阻性黄瘟14d 组( 14d) 和梗阻性 黄瘟 21d 组 C21d) ，分别于术后7、]4 和 21d 取肝下下腔静脉血、门静脉血和肝 静脉血。以肝素抗凝保存，备作测定 CO 之用，并取心脏血分离出血清，置于 -20 ℃冰箱保存，备作测定血清胆红素之用。同时取肝脏、肺脏、心脏等组织标本， 立即置于 4%多聚甲腔固定，包埋切片，制片行 HO斗 mRNA 表达检测。 临床标本:实验组为梗阻性黄 瘟患者 23 例，术中取肝组织标本，立即置于 -80 ℃液氮中保存，待检组织从液氮取出后立即用 4%多聚甲醒固定，包埋切片 。对照 组为同期行单纯胆囊切除术的慢性结石性胆囊炎患者 25 例，取材法同实验组 。 2. 研究方法 一般观察:石蜡标本切片以 HE 染色，光镜下观察胆管扩张、肝窦充血、纤维 组织增生、炎性细胞浸润情况:用自动生化分析仪测定大鼠血清胆红素含量。 原位杂交法:检测大鼠肝脏、心脏和肺脏 HO-lmRNA 的表达，检测人体肝脏 HO-lmRNA 的表达。 双波长分光光度计法:测定大鼠肝静脉、门静脉及下腔静脉血浆中 co 含量。 3. 统计学方法:数据用均数土标准差(二土s) 表示，应用 SPSSIO.O 统计软件 包，采用 F 检验、 q 检验、 t 检验及直线相关分析 ，PO.05 有显著性差异 ，PO.Ol 有极显著差异。 结果2 1.实验研究结果 ].] HO-lmRNA 表达:正常大鼠肝脏无 HO-lm 阳lA 表达，梗阻性黄痕大鼠 肝JIll 中 HO-lmRNA 表达上调， 7d、J4d 和 21d 组平均染色指数分别为 0.10 、0.38 和 0.68 ，随着胆道梗阻时间延长，其表达呈上升趋势。 7d 组大鼠肝脏散在 HO-lmRNA 表达呈弱阳性， J4d 组和 21d 组肝细胞中 HO-lmRNA 表达均较 7d 组 明显增加，差异有显著性 (PO.OI)。梗阻性黄痕^鼠心脏中仅在21d 组见有 HO-lmRNA 微量表达，对照组、 7d 组和 14d 组均无表达。正常组大鼠肺组织未见 HO-Im刚A 表达， 7d 组大鼠肺泡上皮细胞 HO-lmRNA 表达呈中度阳性，平均染 色指数为 0.21 ，14d 组可见支气管粘膜上皮细胞、血管内皮细胞中 HO-lmRNA 高 表达，平均染色指数为 0.36，而在21d 组其表达进一步增强，平均染色指数达 0.580 1.2 正常及梗阻性黄症大鼠血浆 CO 含量的变化:梗阻性黄瘟各组肝静脉血 浆中 CO 含量较 CG 组增高，以 14d 和 21d 组升高更为明显 (PO.Ol); 14d 组门 静脉血浆中 CO 含量升高明显，与 CG 组比较差异有显著性 (P0.05); 梗阻性黄 瘟各组肝静脉血浆中 co 含量与同时间组门静脉血浆中 CO 含量相比均显著升高 (PO.Ol);肝下下腔静脉血浆中 CO 含量随胆道梗阻时间延长有所增高，但与 CG 组比较无显著性 (P0.05)0 7d 、14d 和 21d 组肝静脉血浆中 CO 含量的增高与同 时间组肝细胞中 HO-lmRNA 表达的变化呈显著F相关 (PO.OI )，相关系数 y 分 别为 0.752、0.877 和 0.808。 2. 临床研究结果 对照组肝细胞可见微弱 HO-lmRNA 表达，平均染色指数 0.09，实验组肝细胞 HO-lmRNA 表达呈中重度阳性，梗阻性黄瘟患者肝脏 HO-lmRNA 表达以门静脉 周围肝细胞胞浆中最强，周边运渐减弱。实验组平均染色指数为 0.41，较对照组 明显升高，差异有极显著意义 CPO.OI) 。 结论z 梗阻性黄瘟大鼠肝脏 HO-Im刚A 表达增强，致肝静脉血浆中 CO 含量 升高，这与梗阻性黄瘟时肝脏功能受损、肝脏循环障碍有关。梗阻性黄瘟大鼠肺 脏 HO-lmRNA 高表达可能与梗阻性黄瘟时血流动力学改变有关，结果有助于肺赃 血流量的增加。 梗阻性黄症患者肝细胞 HO-lm刚A 表达明显增强，有助于舒张肝脏血管、增 加肝脏血流量、改善肝脏循环，从而有利于减轻梗阻性黄瘟患者肝脏功能的损害。 关键词z 梗阻性黄瘟:血红素氧化