地西他滨对白血病细胞WT1基因表达及启动子区域甲基化水平的调控研究-内科学(血液病学)专业论文.docxVIP

IV IV 中文摘要 地西他滨对白血病细胞 WT1 基因表达及启动子区域甲基化水平的调控研究 化率(4±0.2)%，正常人骨髓单个核细胞 WT1 启动子区域甲基化率(2±0.1)%； 3.地西他滨均可引起 U937、K562 细胞株的凋亡，具有时间和剂量依赖性；而作用于 正常人骨髓单个核细胞后凋亡率较低，并且未体现时间依赖性； 4.给予不同剂量地西他滨后 U937、K562 的 WT1mRNA 表达量均上升，具有时间剂 量依赖性，且 U937 上升程度较大；给予不同剂量地西他滨后 U937 的 WT1 启动子区 域甲基化水平下降明显，具有时间剂量依赖性；K562 给药前后 WT1 基因启动子区域 甲基化水平无明显变化。 5.四例临床患者使用地西他滨后，WT1mRNA 表达水平上升，且 WT1 基因启动子区 域甲基化水平有不同幅度下降。 结论：1.在白血病细胞株 U937、K562 中，WT1 基因 mRNA 表达和启动子区域甲基 化水平呈负相关，而正常人骨髓单个核细胞上 WT1 基因表达阴性，且启动子区域低 甲基化。 2.地西他滨对于白血病细胞株 U937、K562 促进凋亡，并且促凋亡的效应强于对正常 人骨髓单个核细胞促凋亡效应。 3.地西他滨对于白血病细胞株 U937WT1 启动子区域去甲基化作用显著，并有效提高 WT1 基因 mRNA 表达量。在临床患者体内也有相似效应。 关键词：地西他滨；DNA 甲基化；WT1；白血病； 作 者：王 婧 指导老师：傅琤琤 副教授 PAGE PAGE VI 地西他滨对白血病细胞 WT1 基因表达及启动子区域甲基化水平的调控研究 英文摘要 The research on the regulation of leukemia cells WT1 gene expression and DNA promoter methylation by decitabine Abstract Objectives: Research the WT1 gene mRNA expression and the DNA promoter region methylation changes of leukemia cell line U937, K562, leukemia patient cell, normal bone marrow mononuclear cells before and after decitabine, observe the apoptosis of U937 cell line, K562 cell line, normal bone marrow mononuclear cells with decitabine. Discuss the possibility of decitabine demethylation to activate the silencing or low WT1 gene after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, consequently increase the specific antigen-antibody reaction to kill leukemia cells. Methods: Real-time PCR detection of two kinds of leukemia cell line(U937,K562) and normal bone marrow mononuclear cells WT1 gene mRNA expression; Bisulfite sequencing method(BSP) detection of two kinds of leukemia cell line(U937,K562) and normal bone marrow mononuclear cells WT1 gene methylation in the promoter region of the state; Comparison of the WT1 gene mRNA expression and methylation differences. 英文摘要 地西他滨对白血病细胞 WT1 基因表达及启动子区域甲基化水平的调控研究 Flow cytometry to detection of two kinds of leukemia cell lines(U937,K562) and normal bone marrow mononuclear cells apoptosis rate with treated different conce