缝隙连接阻断剂对Wistar大鼠和SHR脑动脉电生理特性的影响-生理学专业论文.docxVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………………………… Ⅰ 英文摘要…………………………………………………………………………………… Ⅱ 英文缩语表………………………………………………………………………………… Ⅲ 前言………………………………………………………………………………………… 1 材料与方法……..………………………………………………………………………….. 4 1.1 实验动物及分组...…………………………………………………………………….. 4 1.2 主要实验试剂...……………………………………………………………………….. 4 2.1 大鼠血压测定…………………………………………………...…………………….. 5 2.2 溶液配制.…..………………………………………………………………………….. 6 2.3.标本制备.……………...………………………………………….………………… 7 2.4 微电极制备………………………………….…………………………….………… 9 2.5 全细胞膜片钳记录方法.…………………………………………………………........ 9 3.统计学处理.………………………………………………………………………….... 11 实验结果….……………………………………………………………………………....... 12 1.SHR 和 Wistar 大鼠微动脉血压测定………………………………………………… 12 2. SHR 和 Wistar 大鼠脑动脉平滑肌细胞的电生理学特性…………………………… 12 3.18β-GA 对 Wistar 大鼠和 SHR 脑微动脉平滑肌细胞的影响…….………………… 13 4.不同缝隙连接阻断剂对大鼠脑动脉平滑肌细胞间的影响…….…………………… 17 讨论…….…………………………………………………………………………………... 21 结论和展望.………………………………………………………………………………... 25 参考文献……….…………………………………………………………………………... 26 文献综述…….……………………………………………………………………………... 31 致谢….………………………………………………………………………………........... 38 作者简介…….……………………………………………………………………………... 39 导师评语…….……………………………………………………………………………... 40 摘要 目的：本研究比较正常血压 Wistar 大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)脑微动脉段平滑肌细胞电生理学 及缝隙连接耦联力的异同，并观察 18β-甘草次酸（18β-GA）、尼氟灭酸（NFA）、2-氨基乙基二苯硼 酸酯（2-APB）对脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接的影响。 方法：应用全细胞膜片钳技术，观察并比较 SHR 和 Wistar 大鼠脑动脉平滑肌细胞的生理学特性和 18β-甘草次酸对 Wistar 大鼠和 SHR 脑微动脉段上平滑肌细胞膜电容（Cinput）、膜电导（Ginput）和膜 电阻（Rinput）的影响，及 18β-GA、NFA、2-APB 分别对 Wistar 大鼠脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接 的作用。 结果：(1) SHR 脑微动脉段上平滑肌细胞的 Cinput 和 Ginput 高于 Wistar 大鼠，差异有统计学意义 （P0.05）。18β-GA 可以浓度依赖性的降低脑微动脉段上平滑肌细胞的 Cinput 和 Ginput（或者增加 Rinput）。18β-GA 抑制 Wistar 大鼠和 SHR 脑微动脉段上平滑肌细胞 Ginput 的 IC50 分别为 5.1 和 5.3 μmol/L，差异无统计学意义（P0.05）。18β-GA 浓度≧100 μmol/L 时，Wistar 大鼠和 SHR 脑微动脉 段上平滑肌细胞的 Cinput、Ginput 或 Rinput 与单个平滑肌细胞十分接近。 (2) 18β-甘草次酸（18β-GA）、尼氟灭酸(NFA)、2-氨基乙基二苯硼酸酯(2-APB)能浓度依赖性 的抑制 Wistar 大鼠脑动脉平滑肌细胞间的缝隙连接，IC50 分别为 5.1、6.6 和 4.1 μmol/L，当 18β-GA、 NFA、2-APB 浓度≧100 μmol/L 时， Wistar 大鼠脑微动脉段上平滑肌细胞的 Cinput、Ginput 或 Rinput 与 单个平滑肌细胞十分接近。 结论：SHR 脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接耦联力增强。18β-GA 可以浓度依赖抑制 Wistar 大鼠和 SHR 脑微动脉平