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低频超声联合多西他赛对小鼠乳腺癌移植瘤模型疗效评估及相关机制的初步研究-影像医学与核医学专业论文
万方数据 万方数据 原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者: 日期: 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑 州大学。必威体育官网网址论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者: 日期: 年 月 日 摘 摘 要 低频超声联合多西他赛对小鼠乳腺癌移植瘤模型疗效评估 及相关机制的初步研究 研究生: 王琰 导 师: 崔可飞教授 郑州大学第一附属医院超声诊断科 河南郑州 450052 摘 要 背景及目的: 目前,乳腺癌是威胁着全世界女性生命健康的最常见的恶性肿瘤之一,它 发展迅速,容易产生转移,且发生因素非常复杂,与环境、遗传、生活方式等 都有着紧密的相关性,严重影响了女性的生活质量。据统计,每年在全部因恶 性肿瘤死亡的女性中有约13%左右的女性是因乳腺癌而死亡。再者,世界范围 内乳腺癌发生率呈逐年递增趋势,患病人群也趋于年轻化[1]。临床医学等各领域 对其机制、治疗方法及药物研究不曾间断。目前对乳腺癌的治疗主要包括化学 药物治疗、放射治疗、内分泌治疗及手术切除。但是对于乳腺癌晚期的病人, 已经丧失了手术机会,而内分泌治疗对三阴性乳腺癌患者无效,同时放射治疗 不能选择性的杀灭肿瘤细胞,它在杀死肿瘤组织的同时破坏肿瘤周围的正常细 胞及组织,严重者甚至会造成患者骨髓抑制等[2]。故一般多采用化疗药物治疗。 但是化疗药物对肿瘤的敏感度低,再者药物的耐药性及对身体的损害一直是摆 在临床医生及病人面前的巨大的障碍。基于以上因素,急需要新的安全有效的 治疗方法来提高晚期乳腺癌患者的生存期及生活质量。低频超声是一种机械波, 因为其特点为频率较低,波长长、强度不高、故容易穿透组织被组织吸收的少, 故而对正常组织损伤小。低频超声与组织的主要生物学效应有机械效应、空化 效应、热效应及化学效应等,其中空化效应对肿瘤的治疗是现阶段的一个研究 热点。空化效应即存在于液体中的微小气泡在超声波的作用下发生振动,当超 I 声波能量达到一个阈值时,微小气泡快速发生膨胀、收缩、崩溃闭合等一系列 变化的动力学过程,且同时释放巨大能量[3]。国内外研究显示利用低频超声的空 化效应可以破坏肿瘤血管,而血管是肿瘤生长及转移的必要条件。另外低频超 声可以增加细胞膜的通透性提高细胞药物浓度,提高药物利用率,降低毒副作 用从而抑制肿瘤的生长。随着对低频超声的不断探索研究,低频超声作为一种 新型肿瘤治疗的手段,越来越被国内外认可,但是大都尚处于实验室阶段[4]。之 前国内外研究多局限于低频超声对肿瘤细胞干预治疗,如前列腺癌细胞、大脑 胶质瘤细胞、肝癌细胞等,但是对实体肿瘤的研究较少[5-7]。众所周知,血管在 乳腺癌的生长及侵袭等方面扮演着着非常重要的角色。同时紫杉醇类化疗药多 西他赛是乳腺癌晚期治疗的主要化疗药物,可以提高患者的生存期,但是仍不 能避免的产生耐药而影响治疗效果。故本研究通过对建立的Balb/c小鼠4T1乳腺 癌移植瘤模型进行低频超声及多西他赛等不同的干预措施,评价小鼠乳腺移植 瘤的体积变化、分析肿瘤微血管密度(MVD)及与侵袭性、血管生成相关的蛋白 (VEGF、MMP-9、Notch1)表达情况及MVD与蛋白之间的关联性,从而探讨低频 超声对小鼠移植瘤的疗效及相关治疗机制,及低频超声是否能增强紫杉醇类化 疗药多西他赛对Balb/c小鼠4T1乳腺移植瘤的治疗效果。 方法: 1、小鼠乳腺癌4T1细胞的培养:置于恒温37℃、5% CO2培养箱中培养。当 细胞增殖达到培养瓶底面积的85%-95%时,根据实验需要进行重悬传代或冻存。 2、Balb/c小鼠4T1乳腺癌移植瘤模型的建立:注射4T1细胞悬液至Balb/c小鼠 左侧第二对乳腺脂肪垫下(0.3ml/只)。6-8天后成瘤。 3、分组:将成瘤小鼠随机分为对照组、多西他赛组、低频超声组、联合组 (低频超声治疗+多西他赛);后两组小鼠进行低频超声治疗前30min腹腔注射 5%的水合氯醛(0.004ml/g)麻醉。 4、记录小鼠的质量变化及计算各组小鼠移植瘤体积及各组小鼠移植瘤的抑 瘤率(
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