临床分子检测参考物质与室内质量控制-李金明.pdfVIP

临床分⼦检测参考物质及室内质量控制 李金明 国家卫生计生委临床检验中心 全国临床分子检测质量保证大会 2017.11.9-11. 广州 临床常⽤的分⼦检测项⺫ Ø 病原微⽣物核酸检测 Ø 遗传病基因检测 Ø 肿瘤基因突变检测 Ø  SNP 药物基因组 检测 Ø ŸŸŸŸŸŸ 方 法 Ø 荧光PCR方法 （扩增阻碍突变系 统法（Amplification Refractory Mutation System ，ARMS ）、PCR-高分 辨溶点曲线分析（HRM ）、数字PCR 等） 一些其他基因扩增检验 Ø  PCR-杂交法（膜上、芯片[基因芯片] 、 方法：TMA、NASBA、 乳胶颗粒[Luminex]） LAMP、LCR等。 Ø  PCR-Sanger测序 Ø  PCR-焦磷酸测序 Ø  PCR-新一代高通量测序 非扩增的信号放大： （NGS ） bDNA Ø  PCR-SSCP 、RFLP 、dHPLC Ø  基于PCR的微流控芯片 Ø  荧光原位杂交 Ø  直接杂交 分子诊断（Molecular diagnostics）概念发展 Ø  采用分子生物学方法（基因扩增、 测序、杂交、蛋白质组分析、代谢 组学分析等）检测患者体内特定遗 传物质的结构或表达水平的变化而 做出的诊断。 Ø  分子诊断的靶标包括DNA 、RNA 、 蛋白质和小分子代谢物。 分子诊断的组学概念 • 测序：Sanger测序、新一代高通量测序 • 荧光PCR ：实时荧光定量PCR 、ARMS 、HRM 、数字PCR等、 • PCR-杂交法：膜上、芯片[基因芯片] 、乳胶颗粒[Luminex] 基因组学 • PCR-SSCP 、RFLP 、dHPLC等 • 荧光原位杂交、直接杂交 • 其他基因扩增检验方法：TMA 、NASBA 、LAMP 、LCR等 •  基于杂交技术的芯片技术包括cDNA芯片和寡聚核苷酸芯片 •  基于序列分析的基因表达系列分析SAGE （serial analysis of gene 转录组学 expression ，SAGE） •  高通量测序 •  双向凝胶电泳 •  等电聚焦（isoelectric focusing ，IEF ） 蛋白质组学 •  基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS ）和电 喷雾质谱（ESI- MS •  代谢物指纹分析 （metabolomic fingerprinting ），采用液相色谱-质谱联用（LC- MS ）的方法 代谢组学 •  代谢组学分析（metabolomic profiling ）