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项目二发酵条件的优化及扩大培养 ;;;;;;第二章培 养 基;一. 培养基的成分;1. 碳源;葡萄糖 糖蜜 淀粉 油脂 有机酸、醇;2. 氮源;3. 无机盐和微量元素;4. 前体;6. 生长因子;二. 培养基的类型;二. 培养基的类型;二. 培养基的类型;1. 孢子培养基;2.种子培养基(包括摇瓶种子和种子罐培养基): ;种子培养基特点: 1. 必须有较完全和丰富的营养物质,特别需要充足的氮源和生长因子。 2. 种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供孢子发芽生长用的种子培养基,可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。 3. 种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成分相近。;3. 发酵培养基;三. 正交实验;正交实验;1、提供必要的营养成分:培养基成分必须满足细胞生长,代谢活动和合成产物所需的基本要求。 2、配制合适的浓度:可以从发酵动力学有关生长、产物合成和基质利用物料平衡的关系中大致推算或大致计算出所需主要原料的需要量。 3、主成分与其他成分的配比。 C/N比,过高则菌体生长缓慢,过低则衰老自溶 4、控制合适的pH:微生物的生长繁殖或产物的合成往往需要—定的pH环境,在最适pH值下有利于加快各种酶的反应。因此在整个发酵过程中应使培养基的pH适合于微生物生长或产物合成所需。; pH的具体控制方法 (1)可以在微生物培养过程中加入酸或碱或流加某些营养物质调节培养基的pH,但更应在配制培养基时考虑所用营养物质的组成成分,使其pH值适合该微生物生长或合成代谢产物的需要。 (2)还要注意有些营养物质被利用后培养基的pH变化情况. (3)控制pH最常用的方法是在培养基中添加具有一定缓冲能力的物质作为营养物,如以磷酸盐作为磷的成分;或者避免使用容易产生生理酸性或碱性使培养基pH波动太大的物质。 ;5、避免产生微生物不能利用的物质或形成沉淀 葡萄糖与铵盐或氨基酸的氨基在灭菌高温下作用形成深褐色物质。这种物质不被微生物利用。因此这两类营养物不宜直接配在一起进行灭菌,而应采用分开灭菌后再加入发酵罐内。 硫酸铵中的SO42-与钙盐易形成难溶的硫酸钙,因此二者也不宜直接配成培养基。 ;6、注意代谢调节物的影响??? 有些物质存在于培养基中往往能明显地促进或抑制发酵产物的形成。 前体物质 诱导剂 阻遏物 抑制剂 金属离子;(1) 添加有关前体物质:;(2) 添加诱导物:;(3) 注意阻遏物或抑制剂的影响;有些种类的发酵生产对金属离子相当敏感,因为有些金属离子是中间代谢酶的抑制剂或激活剂。 因此对于有重大影响的金属离子必须严格控制。如柠檬酸发酵中铁、锰和锌离子都能明显影响产量,钙离子对细菌淀粉酶的生产有促进作用,而钴离子对葡萄糖异构酶的发酵是必需的,这些在培养基配制时都必须予以注意。;五. 四大类微生物的典型培养基;六. 配制培养基的基本流程;母液的配制;母液的配制;母液的配制;母液的配制;课堂作业;本章节复习题库;本章节复习题库;第四章种子的扩大培养;一. 种子的制备;1. 种子的制备流程;2. 种子罐种子制备;(一)影响种子质量的因素及其控制 培养基 培养条件 种龄 接种量 接种量的大小与该菌在发酵罐中生长繁殖的速度有关;(二)种子质量标准;(三)种子异常分析;三. 柠檬酸发酵生产中的种子扩大培养技术;作业;本章节复习题库
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