《贵州省食品安全地方标准 食品中禁用物质酸性橙Ⅱ染料的测定》（征求意见稿）.doc

DB52 XXXXX—2014 PAGE PAGE 4 ICS 点击此处添加中国标准文献分类号 备案号： DB52 贵 州 省 地 方 标 准 DB 52 XXXXX—2014 食品安全地方标准 食品中禁用物质酸性橙Ⅱ染料的测定 Local?food?safety?standards— Determination of forbidden materials in foods The Acid Orange （征求意见稿） 2014-XX-XX发布 2014-XX- XX实施 贵州省卫生和计划生育委员会 发 布 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准附录A、附录B为资料性附录。 本标准由贵州省产品质量监督检验院提出。 本标准由贵州省卫生和计划生育委员会归口。 本标准参加起草单位：贵州省产品质量监督检验院（国家酒类及饮料质量监督检验中心）、贵州省产品质量监督检验院仁怀分院。 本标准主要起草人：梁桂娟、寻思颖、李红洲、杨波、龙四红、孙棣、肖洋、李凯、黄卫红、韩志平、肖日春、先春。 本标准系首次发布。 食品安全地方标准 食品中禁用物质酸性橙Ⅱ染料的测定 1范围 本标准规定了食品中禁用物质酸性橙Ⅱ的测定方法。 本标准适用于辣椒制品、豆腐干、酱卤肉、果脯、饮料等食品中禁用物质酸性橙Ⅱ染料的测定。 本标准中高效液相色谱法的检出限为0.05mg/kg;液相色谱-串联质谱法的检出限为1.0μg/kg。 第一法 高效液相色谱法 原理 用甲醇提取试样中的酸性橙Ⅱ，经弱阴离子固相萃取小柱净化提取液，用高效液相色谱-二极管阵列检测器检测，外标法定量。 试剂和材料 注：除特殊说明外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水。 试剂 甲醇（CH3OH）：色谱纯 甲酸（HCOOH）：色谱纯 乙酸铵（CH3COONH4）：色谱纯 氨水（NH3·H2O）：分析纯，含量25%～28% 乙酸铵溶液（0.02 mol/L）：称取1.54g3.1.3中的乙酸铵，用少量水溶解后定容至1000mL 氨水溶液（5%）：移取5mL3.1.4中的氨水，用水定容至100mL 酸性橙Ⅱ标准品：分子式C16H12N2O4SNa，CAS号:523-44-4，纯度大于99% 材料 XAW固相萃取小柱（或同等效能的弱阴离子交换固相萃取小柱）：使用前用3mL甲醇、3mL水和3mLPH=4.5的甲酸水溶液依次活化。 0.22μm微孔滤膜 一次性带针注射器 PH试纸 标准溶液配制 酸性橙Ⅱ标准储备液：准确称取0.1g（精确至0.0001g）酸性橙Ⅱ标准品，用少量水溶解后甲醇定容至100mL，配制成1mg/mL的标准储备溶液，于0～4℃保存。 酸性橙Ⅱ标准使用液：用甲醇将标准储备溶液稀释，配制得酸性橙Ⅱ浓度分别为： 0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL。 仪器与设备 高效液相色谱仪（配二极管阵列检测器）。 电子天平：感量分别为0.0001g和0.01g。 组织捣碎器。 涡旋混匀器。 振荡提取器。 固相萃取装置。 氮吹仪。 离心机。 分析步骤 试样制备与保存 取有代表性的样品约500g，用组织捣碎机捣碎后，装入洁净容器作试样，保存于0～4℃。 样品的前处理 提取 称取5g样品（精确至0.01g），加入适量甲醇，在涡旋混匀器上充分混匀后振荡提取20min，用甲酸调PH至4.5，用甲醇定容至25mL,混匀，在8000r/min下离心5min，上清液作待净化液。 净化 移取10 mL待净化液上活化过的XAW阴离子固相萃取小柱，流速不超过1.0mL/min。依次用3mLPH=4.5的甲酸水溶液、3mL水、3mL甲醇淋洗，最后用4mL5%氨水甲醇洗脱。洗脱液在40℃氮吹至近干，用甲醇定容至1mL，过0.22μm微孔滤膜供高效液相仪测定。 液相色谱条件 色谱柱：C18色谱柱，4.6mm×150mm； 流速：1mL/min； 柱温：30℃； 流动相：20mmol/L乙酸铵:甲醇=67:34； 进样量：10μl； 检测波长：500nm。 试样溶液的测定 在5.2.3的高效液相色谱条件下对系列标准溶液和按5.2.2处理好的样品溶液进行测定。保留时间定性，外标法定量。其中，标准溶液与待测溶液的保留时间偏差应在