YAP基因沉默对人前列腺癌细胞增殖、凋亡及其雄激素受体的影响-外科学(泌尿外科)专业论文.docxVIP

重庆医科大学 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 英文全称 中文全称 YAP Yes-associated protein Yes 相关蛋白 DEPC diethy pyrocarbonate 焦碳酸二乙酯 HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶 cDNA complementary DNA 互补脱氧核糖核酸 DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 bp base pair 碱基对 FCM flow cytometry 流式细胞术 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 GFP green fluorescent protein 绿色荧光蛋白 kD kilodalton 千道尔顿 PMSF phenylmethyl sulfonyl fluoride 苯甲基磺酰氟 CCK-8 cell counting kit-8 细胞增殖/毒性检测 ECL electrochemiluminescence 电化学发光 GAPDH glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 shRNA short hairpin RNA 短发卡 RNA PSA prostate specific antigen 前列腺特异性抗原 PBS phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液 β-Actin beta-actin 肌动蛋白 β mRNA messenger RNA 信使 RNA RPMI-1640 Roswell Park Memorial Institute-1640 1640 培养基 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 RT-PCR real-time PCR 实时聚合酶链式反应 g gram 克 1 A MOI absorbance multiplicity of infection 吸光度 复感染指数 PI propidium iodide 碘化丙醇 AR ER androgen receptor estrogen receptor 雄激素受体 雌激素受体 ADT ADPC androgen deprivation therapy androgen-dependent prostate cancer 雄激素剥夺疗法 激素依赖前列腺癌 ml milliliter 毫升 μL SDS microliter sodium dodecyl sulfate 微升 十二烷基硫酸钠 PAGE polyacrylamide gel electrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PVDF polyvinylidene fluoride 聚偏二氟乙烯 AP ammonium persulfate 过硫酸铵 TEMED tetramethyl diethylamine 四甲基二乙胺 Tris tris(hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 TBS tris-buffered saline 三羟甲基氨基甲烷缓 冲液 Tween tween 聚山梨酯 s second 秒 mg milligram 毫克 μg microgramme 微克 min minute 分钟 miRN A microRNA 微小 RNA lncRNA long non-coding RNA 长链非编码 RNA 2 YAP 基因沉默对人前列腺癌细胞增殖、凋亡及其雄激素 受体的影响 摘要 目的：探讨慢病毒介导 shRNA 沉默 Yes-相关蛋白(Yes-associated protein, YAP)基因对人前列腺癌细胞株 LNCaP 细胞增殖、凋亡及其雄 激素受体(androgen receptor, AR)的影响。 方法：3 条针对 YAP 基因的 shRNA（YAP-shRNA1、YAP-shRNA2、 YAP-shRNA3）慢病毒干扰载体感染 LNCaP 细胞，嘌呤霉素筛选 7 天 以上，建立慢病毒稳定感染细胞系；利用实时荧光定量 PCR 和 Western blot 技术分别检测细胞 YAP、AR mRNA 和蛋白表达；选取沉默效率最 高 YAP-shRNA1 慢 病 毒 干扰 载体组 ；以 细胞 增殖 / 毒性检 测 (cell counting kit-8, CCK-8) 、平板克隆形成实验 (colony formation) 测定 LNCaP 细胞增殖能力；Hoechst 33258 染色法对细胞凋亡形态改变进行 检测；流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测细胞周期分布和