GB/T 5511-1985粮食、油料检验　粗蛋白质测定法.pdf

中华人民共和国国家标准 (633.1+633.85) .001.4 粮食、油料检验 5511- 85 粗蛋白质测定法 Inspectionofgrainandoilseeds Methodsfordeterminationofcrudeprotein 本标准适用于商品粮食、油料中粗蛋白质含量的测定。 1仪臼和用具 1.1凯氏烧瓶:50MIr 1.2 圆底烧瓶:1000m1, 1.3 万用电炉， 1.4锥形烧瓶:100MIr 1.5微量滴定管:5m1,刻度。.Olmlt 1.6容量瓶:50mlr 1.7移液管:5m1, 1.8量筒:10m1, 1.8 洗耳球， 1.10 凯氏微量蒸馏装置 (见下图)、胶管等。 凯氏微量蒸馏装置图 1-蒸馏瓶，2一冷凝管，3-承接瓶，9一回流管，5-漏斗， 6-活塞，7-簧夹，B一烧瓶 国家标准局1885-11-02发布 198一 卜01实施 GB5511-85 2 试荆 2.1浓硫酸-过氧化氢一水混合液 ((2:1:3):在l00ml水中缓慢加入浓硫酸200m]，冷却后再加 入30%过氧化氢300ml,混匀备用。此液存放阴凉处可保存一个月， 2.2混合催化剂:硫酸铜 (CuSO,5HzO)log,硫酸钾 (A.R)loog,硒粉0.2g，在研钵中研 细使通过40目筛，混匀后备用; 40 氢氧化钠溶液， ::: 2%硼酸溶液， 2.5 0.01N盐酸溶液; 2.5 甲基红乙醇溶液:0.1g甲基红溶于75m1%%乙醇中 (先在研钵中加乙醇研磨)， 2.了 次甲基蓝乙醇溶液:。.瑰次甲基蓝溶于80m工95%乙醇中。临用时将以上两液按2:1比例混合 即成。在酸域呈紫红色，在PH5.5时溶液无色，在碱域呈绿色。 3 操作方法 3.1 消化 按照含有10^-30mg粗蛋白质计算试样用量，一般可称取试样。.2-0.39(W,精确到。.0001g), 用蜡光纸卷着倒入50M工凯氏烧瓶中，加混合指示剂lg，同时加入硫酸一过氧化氢-水混合液3-5ml, 稍加振摇，斜置于电炉上，在通风橱内加热进行消化。开始时用低温加热，勿使瓶中泡沫超过瓶肚的三 分之二，待泡沫减少和烟雾变白后再增加温度保持微沸。消化到溶液呈浅蓝绿色的透明状时，再继续加 热沸腾10min，取出待消化液冷却至室温后，加水10-20ml，再待溶液温度降到室温后，千净地转入 50m1容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀备用。 3.2 蒸馏 按照凯氏微量蒸馏装置图的安装进行燕馏和吸收， 在烧瓶8内加水400m1和少量碎玻璃片，加5滴混合指示剂，加几滴酸液使水呈紫红色，连接 4,1,2，并检查有无漏气处。 量取30m11%确酸溶液注入锥形瓶3内，加混合指示剂2滴，使冷凝管下端插入液面下lcm处。量 取稀释的消化液5m1，由漏斗5注入瓶1内，再加水loml，冲洗漏斗5。量取40%氢氧化钠溶液lm工， 提起活塞注入瓶1内，立即用水2-5ml冲洗漏斗5,旋紧活塞。这时瓶1内溶液总体积不要超过其容 量的一半。 打开簧夹7，关闭活塞6，加热烧瓶s,待瓶1内溶液开始沸腾时开始计时，经2min降低瓶3, 使冷凝管下端露出液面，再燕馏1min后，用水冲洗管下端。 蒸馏结束后，掐紧簧夹7,断绝蒸气，使瓶1内溶液全部吸入管4中，放松簧夹7，从漏斗5加入 蒸馏水40.50m1，再通蒸气加热和回流，将瓶1洗涤一次备用。 3.3 滴定 用。.01N盐酸溶液滴定瓶3中的吸收液，滴至溶液出现浅紫红色为止。 为消除试剂误差，除不加