ELISA法检测乙肝表面抗原结影响因素探究.docVIP

ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素探究 　　【摘要】 目的 探讨酶联免疫吸附法（ELISA法）检测慢性乙型肝炎（乙肝）表面抗原中的有关影响因素。方法 231份乙肝表面抗原样本， 采用ELISA法检测， 针对影响检测结果的各方面因素进行分析。结果 第一组样本在0.5 h检测阳性率为12.50%（11/88）， 1 h后检测阳性率为7.95%（7/88）， 2 h后检测阳性率为1.14%（1/88）。第二组4支试管检测阳性率：不抗凝管为2.86%（2/70）， 枸橼酸钠管为0（0/70）、肝素钠抗凝管为7.14%（5/70）、EDTA-K2管为0（0/70）。第三组样本检测阳性率与血细胞水平浓度由低到高依次为9.59%（7/73）、54.79%（40/73）、100.00%（73/73）。结论 采用ELISA法检测乙肝表面抗原过程中， 其检测结果受多方面因素影响， 为保证检测的准确率， 需要进行重复性试验并换用不同方式进行测定， 以保障检测准确性。 中国论文网 /6/viewhtm　　【关键词】 酶联免疫吸附法；乙肝表面抗原；影响因素 　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.33.016 　　采用ELISA法对乙肝表面抗原结果进行检测为临床最常用检测方式， 该检测方式具备操作简单、灵敏度高且存在有较高特异性等方面特点， 可有效提升临床对乙肝病症诊断效率。而结合实际情况可知， 在采用该法检测过程中存在有一定假阳性率[1]， 很容易对被采集者造成精神压力。为有效保证该检测技术准确性， 使得该检测方案临床价值进一步彰显。本次本院就针对ELISA法检测乙肝表面抗原过程中有关影响因素加以分析， 报告如下。 　　1 材料与方法 　　1. 1 材料来源 收集本站2016年1～12月乙肝表面抗原样本231份， 本组血液样本男131例， 女100例， 年龄28～48岁， 平均年龄（31.01±1.74）岁。 　　1. 2 方法 采用ELISA法检测， 所用试剂均符合临床检测标准， 所用设备为RT-2000i酶标仪。在检测过程中， 各方面操作均严格按照规定进行， 并结合检测情况将样本划分为3组。第一组：在本组待检测样本中随机选取88份作为不抗凝血液样本， 将每份样本均分为3支试管， 分别静止0.5、1、2 h后， 于常规离心机中进行离心处理， 转速设定为3500 r/min， 　　离心时间为15 min左右， 待血清后对乙肝表面抗原进行检测。第二组：于本组待检测样本中随机抽取70份， 均分于4支试管中（不抗凝管、枸橼酸钠管、肝素钠抗凝管以及EDTA-K2管）其中不抗凝管， 静置2 h后进行离心检测， 其他试管3 h 　　后去血浆检测。第三组：以余下73份样本（含血细胞）， 按照3个浓度（0.25×1012/L、0.125×1012/L、0.065×1012/L）梯度实施稀释操作后再进行检测。观察三组样本的检测阳性率。 　　2 结果 　　第一组样本在0.5 h检测阳性率为12.50%（11/88）， 1 h后检测阳性率为7.95%（7/88）， 2 h后检测阳性率为1.14%（1/88）。第二组4支试管检测阳性率：不抗凝管为2.86%（2/70）， 枸橼酸钠管为0（0/70）、肝素钠抗凝管为7.14%（5/70）、EDTA-K2管为0（0/70）。第三组样本检测阳性率与血细胞水平浓度由低到高依次为9.59%（7/73）、54.79%（40/73）、100.00%（73/73）。 　　3 讨论 　　乙肝为临床较为常见病症类型， 主要因乙型肝炎病毒感染而导致， 存在较高的传染性及危害性。临床多采用ELISA法对血液样本进行检测， 基于该检测方式具备操作简单、灵敏度高等方面特点， 在很大程度上提升了临床对乙肝的检出效率。而结合实际可知， 该检测方式在运用中容易受多方面因素影响。 　　3. 1 不抗凝血液样本 结合本次观察可知， 在不同自凝时间进行检测， 在检测结果上存在一定差异。在实际检测工作中， 出于多方面原因， 血液尚未开始凝固时便开始进行检测， 很容易导致假阳性结果。主要因血清中存在有少量纤维蛋白原， 易在反应孔壁中黏附， 甚至在孔中出现凝集， 使得酶结合物在孔中被吸附所致。同时， 纤维蛋白原的反应微环境发生改变同样会使得检验的灵敏度降低， 造成假阴性[2， 3]。 　　3. 2 加抗凝剂标本 主要因在使用抗凝剂的过程中， 其在发挥抗凝作用的同时， 会与血液中有关物质形成结合物， 起到对检测系统中过氧化物酶显色反应抑制或者促进的效果， 影响到检测结果。 　　3. 3 保障检测结果准确性有关对策 结合上述因素分析， 为有效保障该检测系统在运用中的准确性， 需要对以下几方面内容加以重视：①做好检