病理组织切片技术课件.pptVIP

组织制片技术; 病理组织制片技术  定义;组织制作基础制作流程;一、取材 定义;取材 要求;4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。;取材台;二、固定 定义; 固定 目的;固定 方法;常用固定液 特性;常用的固定液;中性甲??液： 甲醛120ml，蒸馏水880ml，磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠13g配制而成，PH值达到７。此固定液是人体组织和动物组织常用之固定液，特别是作免疫组织化学染色固定时效果较好。 乙醇-醋酸-甲醇液 乙醇-甲醇液（AF液）： 95%或无水乙醇90ml，40%甲醛10ml配制而成 Bouin液 Zenker液 ;固定的注意事项;组织固定的常见问题;固定不充分 固定充分;三、洗涤、脱水、透明;洗涤  定义;洗涤 目的;洗涤的方法;脱水 定义;无论是用石蜡切片，还是用火棉胶切片，都必须除去组织中所含水分，因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容，常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。;;脱水 目的;常用的脱水剂;丙酮 沸点56℃，可用于染色前后的脱水，对组织的脱水作用，收缩作用均比乙醇强，价格较高，一般很少单纯使用。;丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂，但因其脱水能力很强，对组织有剧烈收缩作用，在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于石蜡，还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等 ;异丙醇 是乙醇的良好的代用品，不含水，可代替无水乙醇。;脱水的方法;;透明 定义;透明 目的;常用的透明剂;常用的透明 方法;四、浸蜡、包埋;浸蜡 定义;浸蜡的 目的;浸蜡的 种类;浸蜡的方法;浸蜡的 注意事项;;包埋 定义;包埋的目的;包埋方法;包埋的注意事项; 包埋机;组织包埋盒;四、切片;常用的切片方法;切片前准备;(2)准备好切片用具;(3)安装蜡块;(4)安装切片刀;(5)切片的厚度;切片制作过程;切片的注意事项;蜡片厚度一般在3-5um 同一把切片刀每次要固定角度 切片有纵纹,可能与切片刀有小缺口或修块时未把杂物去除,以及石蜡不洁有关;切片机;五、展片;展片 定义;展片;捞片;捞片;六、贴片、烤片;贴片、烘片;烤片机;七、染色;染色 定义;常用的染色方法;苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色，如细胞核中的染色质等；伊红是一种酸性染料，可使组织中的嗜酸性物质染成红色，如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。;H.E染色程序如下;切片脱水透明要彻底;注意; 一张高质量的HE切片要求; 切片完全干涸，会使组织收缩、割裂，形成所谓”龟裂”现象。也会使部分细胞核透明不良，看起来像黑色的细胞核。 ??? 完成染色后，每张片子要在显微镜下观察，检查制片过程中有没有发生差错。 ;八、封片;封片注意事项;谢谢！