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医学ppt课件血液的一般检查
主讲 李妤蓉;绪 论;教学目标;教学内容;教学重点;二、临床检验在医学中的作用 ;2、为分析病情、观察疗效、判断预后提供依据;三、临床检验的一般方法;四、学习临床检验的目的和要求;第一章 血液学一般检验;一、血液生理概要;二、血液标本的采集;毛细血管采血法;静脉采血法;两种采血方法的优缺点比较;三、血液标本的抗凝;常用的抗凝剂和适用;2. 草酸钠(乙二酸的钠盐);3. 双草酸盐抗凝剂 ;4. 肝素 (含硫酸基团的粘多糖);优点:抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易 溶血、抑制血小板聚集、能耐高温。;5. 乙二胺四乙酸(EDTA)盐; 物理方法抗凝 脱纤维蛋白: 将血液注入有玻璃珠的器皿中,转动,纤维 蛋白缠绕凝固于玻璃球,从而防止血成凝块。适 用于免疫学检验、红斑性狼疮细胞和细菌培养血 培基的制备。;四、血涂片的制备技术; 2. 玻片的处理: 3. 血涂片制备方法:推片法、拉片法、压拉法、棕黄层涂片法 血标本的来源 血涂片既可直接用非抗凝的静脉血或毛细血管 血,也可用经EDTA抗凝的血液制备. ;将推玻片向1的方向稍抽回,当血液充满推玻片的宽度后,以一定均匀的速度向2的方向滑动。;;;小结;复习题;4、血沉测定血和抗凝剂的比例是: A 1:9 B 1:4 C 1:10 D 以上都不对 5、血凝四项抗凝剂的最佳选择是 A 枸椽酸钠 B 乙二胺四乙酸钠盐 C 双草酸盐 D 肝素 三是非题 1、草酸钾可使红细胞胀大,草酸胺则可使红细胞缩小。 2、血涂片必须用毛细血管血制备。 3、EDTA血制备的血涂片既适用观察血小板形态,又适用观察红细胞和白细胞形态。;五、 血细胞染色技术;a 碱性美蓝:是氯盐,有色部分为阳离子,染细胞核 的染料。如亚甲蓝、天青。;2. 细胞染色原理: 既有物理作用和/或化学作用;;c. 嗜中性粒细胞中的中性颗粒呈等电状态与伊红 美 蓝均可结合,染呈淡紫红色。 ;d. 细胞核蛋白主要由脱氧核糖核酸和强碱性的组蛋白、精蛋白等组成,与酸性伊红结合染成红色;但因核蛋白中还含有少量的弱酸性物质,与碱???美蓝作用染成蓝色,两种颜色混合到一起故成紫红色。;e 原始红细胞和早幼红细胞的胞质和细胞核仁的染色结果。;3)PH对细胞染色的影响 环境PHPI 则该蛋白质带正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红 环境PHPI 则该蛋白质带负电荷增多,易与美蓝结合,染色偏蓝 常用缓冲液调节染色时的PH(6.4~6.8 ) ;3.试剂及其配制 1) Wright染液 瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml 有强大的脱水力,可将细胞固定为一定形态,并使蛋白质沉淀为颗粒状、网状等结构,增加细胞与染料接触表面积,提高对染料的吸附作用,增强染色效果。;4.染色步骤: a. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。 b. 加瑞氏染液覆盖血膜,固定1min。 c. 滴加等量或稍多的缓冲液,混匀,染色5-10 分钟。 d. 用清水冲洗,待干后镜检。;5. 注意事项: a. 血膜干透后才能染色,否则染色时易脱落。 b. 染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关,一般染液淡、染色时间长些效果好。 c. 染液不能过少,以防蒸发沉淀。 d. 冲洗时不能先倒掉染液,应以流水冲,防染料沉着。冲洗时间也不能长。 e. 染色过淡,可复染。 f. 染色过深可用水冲洗或浸泡,还可用甲醇脱色。 ;6. 瑞氏染液的质量评价 ;(二) 姬姆萨染色法; 六、血细胞显微镜计数法 测定方法及评价 器材 显微镜 微量吸管 计数板 血盖玻片 操作方法 质量控制 1、技术误差 采血部位不当 稀释倍数不准 充液不当 血液发生凝固 误认 仪器不准 混合时产生气泡 2、固有误差;血球计数板的构造和使用;白;复习题;3 瑞氏染色常用缓冲液的PH为 A 6.4~6.8 B 6.0~6.4 C 6.4~7.8 D 7.0~7.8 4 白细胞核呈淡蓝色或不着色,红细胞偏红,说明瑞氏染染液 A 偏硷 B 偏酸 C 过浓
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