高考说题2012课件.pptVIP

* * 说题人：张啸宇 试 题 40．（15分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题： （１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有　 　　和　 　　。 （２）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下： 为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是　 　　。 （３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即　　　　　DNA连接酶和　　　　　　　DNA连接酶。 （４）反转录作用的模板是　 　　，产物是　　 　。若要在体外获得大量反转录产物，常采用　　 　技术。 （５）基因工程中除质粒外，　　　　　和　　　　　　也可作为运载体。 （６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 　　　。 考纲要求 （1）基因工程的诞生 Ⅰ （2）基因工程的原理及技术 Ⅱ （3）基因工程的应用 Ⅱ （4）蛋白质工程 Ⅰ Ⅰ:对所列知识点要知道其含义，能够在试题所给予的相对简单的情境中 识别和使用它们。 Ⅱ:理解所列知识和其他相关知识之间的联系和区别，并能在较复杂的情 境中综合运用其进行分析、判断、推理和评价。 命题立意及能力水平考查说明 本题着重考查基因工程方面的知识。限制酶种类、来源、作用特点和所形末端的种类，基因工程的步骤和常用手段。本题用考察手段比较直接，是直接提问。 命题立意： 能力水平: 比较简单题 考查的主要知识点 1.限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端的种类。 2.必须用同种限制酶来切运载体和目的基因。 3.不同的限制酶可以切出不同种类的末端。 4.反转录的原理和过程 5.基因工程中常用的运载体。 6.为了增加基因工程的成功率，对于不同受体所要做的一些特殊处理。 如何讲解本题 首先复习基因工程过程图解： 1.限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端，平末端和黏性末端。2.两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同。 3.ＥcoliDNA连接酶可以连接黏性末端，Ｔ４DNA连接酶可以连接两种末端。4.反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA，利用ＰＣＲ技术进行大量扩增。 5.基因工程中可以选用质粒，噬菌体、动植物病毒做载体。 6.当受体细胞是细菌时，为了增大导入的成功率，常用Ca+处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。 如何讲解本题 本题考察意图明确，完全是可以在复习知识点的过程中就 得以解决。 【答案】（１）平末端和粘性末端 （２）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 （３）Ｔ４　　Ｅcoli （４）mRNA 单链ＤＮＡ　　　ＰＣＲ（聚合酶链式反应） （５）动植物病毒　　λ噬菌体的衍生物 （６）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱 【解析】本题着重考查基因工程方面的知识。限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端，平末端和黏性末端。两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同。ＥcoliDNA连接酶可以连接黏性末端，Ｔ４DNA连接酶可以连接两种末端，反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA，利用ＰＣＲ技术进行大量扩增。基因工程中可以选用质粒，噬菌体、动植物病毒做载体。当受体细胞是细菌时，为了增大导入的成功率，常用Ca+处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。 答案 解析 问题推广 问题：基因工程中强调要用同一种酶来切目的基因和运载体 ，那是不是基因工程中就只能用一种限制酶了呢？ 易错点：上题中所说的用同一种酶不是说只能用一种酶，而是说切目的基因用了 哪些酶那么切质粒的时候同样要用这些酶。 答案：不是的，有时候巧用多种酶同时来切目的基因和质粒往往可以达到 意想不到的效果，比如可以防止目的基因或质粒的自身环化等。 延伸 拓展 苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。 (1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。 (2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得_______