第3章 核酸化学PPT.ppt

第三章;本章内容;概念;分布： ;第一节 核苷酸;一、核酸中的戊糖;二、碱基;2、嘌呤碱(purine)：由嘌呤衍生而来。;3、稀有碱基：;三、核苷(nucleoside);核苷的表示：;四、核苷酸(nucleotide，nt);2、结构：;3、表示：;4、特殊核苷酸：;2）核苷多磷酸和寡核苷多磷酸：;五、核苷酸的连接方式;3 ′ —5 ′磷酸二酯键;2、核酸的一级结构;1）一级结构表示方法如下：;2）读向 ;第二节 DNA ; 天然存在的DNA分子最显著的特点是很长，如黑腹果蝇最长的DNA分子长2.1cm，而最长的蛋白质分子长度只有3μm；分子质量很大，一般在106~1010,而蛋白质的分子量一般为104~106。; 指在DNA链 中各个核苷酸之 间的连接方式、 核苷酸的种类数 量以及核苷酸的 排列顺序。;DNA的碱基组成;核苷酸排列顺序;（一）双螺旋结构;Watson-Crick的DNA双螺旋;;DNA中的四种碱基及它们间的氢键;双螺旋中的碱基对（base pair,bp);2、双螺旋结构的特点(Watson-Crick模型）;2）结构;3）尺寸;4）双螺旋的稳定性;B-DNA; A-DNA B-DNA Z-DNA;B-DNA与A-DNA;几种DNA钠盐的特点 ：;H-DNA: 三条链局部螺旋;天然DNA有双链DNA（dsDNA）， 有的病毒为单链DNA（ssDNA） 在dsDNA中： 线形分子（大多数） 环状分子（dcDNA）：质粒、线粒体、叶绿体、病毒、细菌;三、DNA的三级结构;1、超螺旋结构;;正超螺旋和负超螺旋;2、核小体中的  扭曲方式;四、DNA的功能;1）原核生物基因组;C、基因有重叠； 同一核苷酸顺序中包含多种生物信息。;2）真核生物基因组;启动子;内含子与外显子;2、DNA是遗传信息的载体;3、DNA是变异的物质基础;第三节 RNA;一、RNA的结构 组成：4种核苷酸（A、U、G和C），有稀有 碱基。 连接：3′-5′磷酸二酯键。 形成：一般以DNA为模板合成，有例外。 结构：单链线形分子，局部区域有双螺旋。;二、RNA的类型; 此外，在真核细胞中还有少量其他种类的RNA：;1、tRNA;1）tRNA结构;tRNA三级结构为倒L型;;A：在pr.合成中转 运aa； B：在pr.合成的起 始、DNA反转录合 成及其它代谢调节 中起作用。;2、mRNA和hnRNA;切除内含子;2) mRNA结构特点：;;3) 功能：是蛋白质合成的模板;mRNA;3、rRNA;;4、RNA的功能;;第四节 核酸的性质;一、一般理化性质 1、外观：DNA为白色纤维状固体；RNA 为白色粉末状固体。 2、两性电解质： 3、溶解性：微溶于水，不溶于一般有机试 剂（乙醇沉淀核酸），钠盐易溶于水。 4、粘度高：一般DNA比RNA粘度高。 5、水解性：可被酸、碱或酶水解，DNA 比RNA对稀碱稳定。;5、颜色反应：;二、紫外吸收性质;2、确定所提取的核酸是否纯品。 1）DNA： ≈1.8 纯品 OD260/OD290 ＞ 1.8 RNA 污染 ＜ 1.8 pro 污染 2）RNA： OD260/OD290 ≈2.0 纯品;3、紫外可使相邻T T间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体，引起基因突变。;三、核酸的变性;2）结果：A、增色效应： 260nm紫外吸收增加； B、粘度下降、浮力密度上升； C、生物学性能部分或全部丧失。 3）引起变性的因素： 温度、pH、尿素、甲醛等。;2、热变性与Tm;3、影响Tm的因素：;DNA分子的Tm与GC含量的关系;盐浓度对DNA变性的影响;四、核酸的复性;DNA变性与复性;五、分子生物学技术;2)探针（probe);上：探针标记 右：放射自显影;;（二）限制性内切酶：;2、水解酶——水解磷酸二酯键;3、限制性内切酶;粘性末端; 应用于克隆、测序、检测DNA等。;（三）DNA 凝胶电泳;;;（四） Southern印迹法;Northern blot：用于检测RNA Western blot：用于检测蛋白质;（五）聚合