生化检验验室基本知识.pptVIP

第三章 生化检验实验室基本知识; 水是常用的溶剂，天然水中含有许多杂质，如悬浮物、胶体物质和溶解物质，必须经处理去除杂质成为纯水，才能用于生物化学实验。否则，将严重影响实验结果的准确度和精密度。 一、纯水的制备方法 （一）蒸馏法 将自来水在蒸馏器中加热气化，然后冷凝水蒸气即得蒸馏水，必要时可将蒸馏水再进行蒸馏得双蒸水。蒸馏水在25℃时的电阻率为1×105Ω/cm左右。 ; （二）离子交换法 将自来水通过离子交换柱去除水中杂质的方法。离子交换树脂是一种人工合成的带有交换活性基团的多孔网状结构的高分子化合物，在网状结构的骨架中，含有许多能溶液中的离子起交换作用的“活性基团”。当水通过阳离子交换树脂时，水中带正电荷的阳离子与树脂中的H+交换，而水中带负电荷的阴离子则与树脂中的OH－交换。离子交换水在25℃时的电阻率为5×106Ω/cm左右。 ; 水的纯度检查包括用电导仪测定其电导率或电阻率，用特定试剂检测水中残留的Ca2+、Mg2+、Cl－、SO42－等成分，细菌培养计数菌落。 1. 电阻率 用电导仪或兆欧表测定，用电导仪测得的电导率，可与电阻率进行换算。电导单位为西门子（s），电导是电阻的倒数，即1s=1Ω－1；每cm长的电导为电导率（s·cm－1）。 ; 2.可溶性硅检验 定性方法：纯水10ml加1%的钼酸溶液15滴，草酸与硫酸的混合液（4%草酸1份，加4mol/L硫酸3份）8滴，混匀，置室温10分钟，滴加1%硫酸亚铁溶液5滴，摇匀，以不显蓝色为合格（≤0..5mg/L） 3. 细菌菌落计数 按常规菌落计数法进行。 4. 实验用纯水标准及用途 1976年，CAP提出了实验用水的三级标准，1985年，NCCLS又提出了新标准。;生化试剂及生化检验用水标准（CAP） 特性指标 Ⅰ级 Ⅱ级 Ⅲ级 pH 6.0～7.0 6.0～7.0 6.0～7.0 电导率（μs/cm，25℃） ＜0.1 ＜ 2.0 ＜5.0 电阻率（MΩ/cm， 25℃ ） ＞10 ＞0.5 ＞0.2 硅酸盐（mg/L） ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 重金属（mg/L） ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ;NCCLS、CAP规定的等级纯水的用途 级别 用 途 NCCLS Ⅰ 原子吸收、火焰光度、电解质、荧光、酶、高灵敏度层析、 电泳、参比液、缓冲液 Ⅱ 一般实验检验、玻璃器皿冲洗 Ⅲ 玻璃器皿洗涤、要求不高的定性实验 CAP Ⅰ 原子吸收、火焰光度、电解质、血气及pH 、酶、缓冲液、 无机元素、参比液 Ⅱ 一般实验检验、血液学、血清、微生物检验等 Ⅲ 普通定性测定、尿液检验、组织切片、寄生虫、器皿洗涤;;; （三）移液管、吸量管 移液管和吸量管是用于准确量取一定体积液体的量出式的玻璃量器。 移液管用于吸取固定量的溶液。最精确。 吸量管是具有分刻度的玻璃管，用于吸取非固定量的溶液。 （四）自动加样器 俗称加样枪，有固定式和可调式两种。其精密度和准确度高于吸量管。;二、普通玻璃仪器的清洗;二、普通玻璃仪器的清洗; 2. 量器类玻璃仪器 如吸量管、滴定管、容量瓶等。使用后应立即浸泡于凉水中，勿使物质干涸；然后用流水冲洗，除去附着的试剂、蛋白质等物质。晾干后浸泡在铬酸洗液中4～6小时（或过夜），再用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～4次，晾干备用