人用聚乙二醇化重组蛋白和多肽制品总论.PDFVIP

1 人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品总论 2 1 概述 3 聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）是一类由环氧乙烷聚合而 4 成的化合物，具有一定分子量分布与亲水性特点，呈线性、分支型及 5 其他特殊类型的分子形态。人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品是通 6 过聚乙二醇端基的活性基团与重组蛋白或多肽的氨基酸侧链基团、N 7 末端/C 末端的氨基或羧基发生共价反应，修饰而成的治疗性药物。 8 本总论规定了人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品生产和质量 9 控制的通用性技术要求，重点针对聚乙二醇修饰的重组蛋白产品。涉 10 及重组蛋白的生产及质量控制，还应符合“人用重组 DNA 蛋白制品 11 总论”及本版药典相关各论的具体要求。 12 2 制造 13 2.1 基本要求 14 人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品具有复杂的质量属性，应在 15 充分了解临床应用目的的基础上确定制品的关键质量属性，以“质量 16 源于设计”、“风险评估”的原则和理念，确定相应的修饰策略、生产 17 工艺、质量控制策略，并通过建立有效的“质量管理体系”保证制品 18 的安全性和有效性。人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品的制造主要 19 包括重组蛋白和多肽的制备、聚乙二醇修饰、修饰产物的分离和纯化 20 及制剂等过程。 21 生产过程中使用的原材料和辅料应符合本版药典的相关要求。制 22 备重组原型蛋白和多肽所需的工程细胞的来源、管理及检定应符合 1 / 10 23 “生物制品生产检定用菌毒种管理规程”和“生物制品生产检定用动 24 物细胞基质制备及检定规程”的相关要求。生产质量管理应符合中国 25 现行《药品生产质量管理规范》的要求。 26 2.2 聚乙二醇 27 应选用适宜的聚乙二醇进行修饰，并明确聚乙二醇的活性基团种 28 类、拟成键的键型、分子形态、分子量范围等质量属性，以确保批间 29 一致性。 30 2.2.1 分子量、多分散性 31 可采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 （MALDI-TOF MS ）、 32 凝胶渗透色谱-多角度激光散射检测器（GPC-MALLS）或凝胶渗透色谱 33 -示差检测器（GPC-RID）等方法测定聚乙二醇的重均/数均分子量及多 34 分散性。 35 2.2.2 端基取代率 36 聚乙二醇的分子末端需经活性基团取代后方可与蛋白质与多肽 37 上的反应基团发生修饰，可采用核磁共振（NMR）或液相色谱柱前衍 38 生法进行测定。 39 2.2.3 杂质检测 40 应对聚乙二醇中可能存在的双醇、断裂与非活化聚乙二醇等特定 41 杂质及其他需要控制的相关杂质进行分析及限量控制。 42 2.3 重组原型蛋白及多肽 43 应按照“人用重组DNA 蛋白制品总论”和相关各论的要求，对原 44 型重组蛋白的理化特性、生物学活性、免疫化学特性等质量属性以及 2 / 10 45 工艺与产品相关杂质进行控制。应尽可能明确原型蛋白和多肽的活性 46 中心、配体或底物结合中心所涉及的氨基酸，抗原表位的结构特点与 47 关键氨基酸序列，以及可能发生修饰的氨基酸在原型蛋白表面的分布 48 情况。 49 2.4 生产过程的控制 50 2.4.1 重组原型蛋白的制备 51 应符合“人用重组DNA 蛋白制品总论”和相关各论的要求。 52 2.4.2 聚乙二醇修饰及偶联工艺 53 聚乙二醇修饰方式包括定点修饰、单位点随机修饰或多位点随机 54 修饰等方式。修饰及偶联工艺的选择应设定适宜的反应条件以降低原 55 型蛋白和多肽药物的活性损失及可能的修饰副产物。应设定关键工艺 56 参数的可接受限值范围，包括聚乙二醇的加入方式、聚乙二醇与蛋白 57 或多肽的投料比、缓冲液的组成及酸碱度、反应条件等。应建立适宜 58 的工艺过程