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第八章反胶团萃取PPT
第八章 反胶团萃取;; 反胶团萃取 ;反胶团的微小界面和微小水相具有两个特异性功能: ①具有分子识别并允许选择性透过的半透膜的功能; ②在疏水性环境中具有使亲水性大分子如蛋白质等保持活性的功能。 反胶团可作为作为生理活性物质以及生物活性大分子的特异性分离场(分离、浓缩等方法)。;反胶团萃取技术的特点;;在AOT反胶团中,水合化一分子AOT需要6~8个水分子,而其他水分子则不受束缚,可与普通水一样自由流动,所以当W>16时,“水池”中的水逐渐接近主体水相粘度,胶团内也形成双电层。 ;反胶团的制备 1.液液接触法 即将含蛋白质的水相与含表面活性剂的有机相接触。 2.注入法 将含有蛋白质的水溶液直接注入到含有表面活性剂的非极性有机溶剂中去。这种方法的过程较快并可控制反胶团的平均直径和含水量。;3.溶解法 对非水溶性蛋白质可用该法。将含有反胶团(W=3~30)的有机溶液与蛋白质固体粉末一起搅拌,使蛋白质进入反胶团中,该法所需时间较长。含蛋白质的反胶团也是稳定的。; ;反胶团萃取蛋白质的基本原理 ;“水壳”模型(water-shell mode)) 蛋白质向非极性溶剂中反胶团的纳米级水池中的溶解,如图所示的四种可能。 ;疏;凡是能够引起静电引力,能够促使反胶束尺寸增大的因素均有利于提高分配系数。 这些因素主要是pH、离子强度、表面活性剂种类和浓度等,通过因素优化,实现选择性地萃取和反萃取。 ;常用的表面活性剂及其相应的有机溶剂;反胶团萃取的工艺过程;溶液的pH 溶液的离子强度 表面活性剂的浓度和种类 其他(有机溶剂、助表面活性剂、温度);纯化和分离蛋白质、氨基酸、酶、多肽等 蛋白质复性、酶活性复性;应用举例 纯化和分离蛋白质 如对于溶菌酶和肌红蛋白的混合溶液(两种蛋白质相对分子量相近,等电点分别为11. 1 和6. 8),用二烷基磷酸盐/ 异辛烷反胶束溶液萃取,并用缓冲液将混合液的pH 值调至9. 0 ,则溶菌酶完全进入有机相中,而肌红蛋白则留在水相。;液膜:通常是由溶剂、表面活性剂和添加剂制成的。溶剂构成膜基体;表面活性剂起乳化作用,可以促进液膜传质速度并提高其选择性;添加剂用于控制膜的稳定性和渗透性。 ;液膜萃取;液膜的种类;液膜萃取;液膜萃取机理; 反萃相化学反应促进迁移 在有机酸等弱酸性电解质的分离纯化方面,可利用强碱溶液为反萃相,与料液中的溶质发生不可逆的反应而促进溶质的迁移。;反向迁移 向膜相内加入流动载体,使供能物质与目标溶质迁移方向相反,这种载体输送方式称为反向迁移,可以实现离子沿反浓度梯度方向迁移。;同向迁移 向膜相内加入流动载体,使供能物质与目标溶质迁移方向相同,这种载体输送方式称为同向迁移,也可以实现离子沿反浓度梯度方向迁移。;① 乳状液膜;②支撑液膜;③流动液膜;乳状液膜的膜相组成;乳状液膜的膜相组成;表面活性剂 表面活性剂对乳状液膜的稳定作用在于其可明显改变相界面的表面张力。表面活性剂的HLB参数是其是否能促进稳定的乳状液膜形成的重要参考指标。HLB=3-6的表活剂用来配制(W/O)/W型液膜,HLB=8-15的用来配制(O/W)O型液膜。 ;影响液膜萃取的操作参数;共存杂质 流动载体为离子交换萃取剂时,料液中如果存在与目标分子带相同电荷的杂质时,由于杂质的竞争会减小用于目标分子和供能离子输送的载体量,引起目标分子通透性的下降。 反萃相 对于依赖反萃相化学反应促进迁移和膜相流动载体促进迁移的萃取过程,反萃相的组成和浓度影响萃取速率和选择性。 ;操作温度 操作温度的升高使溶质的扩散系数增大,利于萃取速率的提高。但较高的温度,使得液膜粘度降低,膜相挥发速度加快,甚至引起表面活性剂水解,使液膜不稳定。 萃取操作时间 乳状液膜为高度分散体系,相间接触比表面积大,且液膜膜薄,传质阻力小,短时间即可萃取完全。;液膜分离技术的应用;液膜分离萃取柠檬酸;三 微波辅助萃取;微波萃取机理;微波提取在应用中应注意的几个问题;微波提取在应用中应注意的几个问题;课堂讨论题1:;1. 为什么萃取时适宜的pH=9.0左右 ? 不能过大的理由。 2. 萃取时温度为什么应升至35℃左右? 3. 反萃取主要为了除去哪类杂质? 4. 适宜的反萃取pH应满足哪些条件?过高或过低有何不利? 5. 若萃取液中混有一碱性杂质,极性较弱(pK杂pKSPM),如何除去? 6. 若萃取液中混有一碱性杂质,极性较强(pK杂pKSPM),如何除去? ;解答:;2. 萃取时温度为什么应升至35℃左右?;3. 反萃取主要为了除去哪类杂质?;5.若萃取液中混有一碱性杂质,极性较弱(p
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