刺山柑组织培养快速繁殖及rapd研究-study on rapid propagation and rapd in tissue culture of capparis spinosa l..docxVIP

独 创 性 声 明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中 不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得新疆农业大 学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对 本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年月日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：新 疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文 档，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，允许论 文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索，可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（必威体育官网网址的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月第 1 章引言1.1药用植物生物技术概述我国是世界上药用资源最丰富的国家之一。1982 年，国家就对全国中药资源进行系 统调查研究，普查历时 10 年。结果表明，我国中药资源达 12 807 种。在药用植物中，藻类 115 种，菌类 292 种，地衣类 52 种，苔藓类 43 种，蕨类 456 种，种子植物类 10 188 种[1]。由于野生药用资源的不断减少及人类需求的不断增加，再加上药用植物生长较慢、 生长环境特殊不断遭到破坏等原因，导致药用植物的天然产物供不应求。目前对药物的 不合理开采已经严重破坏了物种的遗传多样性，若不对其进行合理的保护和利用，将有 可能导致物种的灭绝。在已出版的《中国植物红皮书》第 1 卷中，共收载了 388 种国产珍稀濒危野生植物，其中有药用价值的 100 余种，在中国历史上就已赫赫有名的人参、 天麻、黄连、黄芪、杜仲、厚朴、巴戟天、贝母、肉苁蓉等均列位其中。因此利用现代 生物技术手段，在开发利用药用植物资源的同时，同时开展对珍稀濒危药用植物资源的 保护研究，以保证药用资源可持续性利用，造福人类。植物代谢中对植物生长和存活必需的复合物，如：糖类、脂肪、核酸和蛋白质等， 称为初级产物。对植物体中一些物质如类萜、酚类和生物碱等，是由糖类、脂肪和氨基 酸等衍生而来，称为次级产物。目前，大约已有20多种植物组织培养中的有效物质高于 原植物，国际上已获得这方面专利100多项[2]。细胞悬浮培养的方法生产微生物以及人工 不能合成的药物或有效成分的研究，正在不断深入发展，有些已投入工业化生产，预计 今后将有更大发展。利用组织培养技术，在人工培养的条件下，高密度的大量培养有用 的植物细胞，分离提取细胞培养物与自然生长的原植物中的有效成分进行比较，优化培 养条件和培养基组成，不仅可以加速植物的生产，防止因过分采集造成资源枯竭，同时 可以从组织和细胞中提取活性成分，为活性成分生产开辟了一条新的途径。生物技术的发展和应用为获得植物次生代谢产物开辟了一条有效途径：基于植物细 胞的全能性原理，借鉴微生物发酵工业的成就和经验，可以通过高等植物细胞、器官等 的规模培养，生产有用的次生代谢产物；也可以利用分子生物学的手段对药用植物进行 遗传操作，获得转化的基因植物或转基因组织和器官，或者寻找到次生代谢产物生物合成途径中的关键酶基因，进而对这些次生代谢产物的生物合成进行调控或将其转入微生物中生产所需要的次生代谢产物等；虽然这些领域的研究并非一帆风顺，但已取得了一 些令人鼓舞的进展[3]。1.1.1药用植物组织培养技术研究方法及进展植物组织培养开始于20世纪初，是以植物生理学为基础发展起来的一项技术。植物 组织培养（plant tissue culture），即通过无菌操作把植物体的器官、组织、细胞甚至原生 质体接种于人工配制的培养基上，在人工控制的环境条件下进行培养，使之生长、繁殖 或长出完整植株的技术和方法[4]。药用植物组织培养所依据的理论是细胞的全能性。该 理论是Schleiden和Schwan分别在1838年和1839年的细胞理论中提出的，即离体细胞在生 理上、发育上具有潜在的“全能性”这一理论阐明了一种植物体内所有活的细胞，在一定 的离体条件下可以逐步失去原有的分化状态，转变为具有分化能力的胚胎细胞，再增殖 而分化成完整植株的潜在能力。一个已分化的细胞或组织若要表现其全能性，一般要经 历两个过程：脱分化和再分化。脱分化[5]（defifferentitation）是指植物离体的器官、组 织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈 伤组织或细胞团。所谓再分化[6]（rededifferentiation）是指离体培养的植物组织或细胞可 以由脱分化状态再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器宫，甚至最终再生成完