不同生姜提取物对雄性小鼠生殖毒性的研究课件.pptVIP

不同生姜提取物对雄性小鼠生殖毒性的研究 答 辩 人：沈雪 指导老师：卢静 军需科技学院食品质量与安全系 研究内容 研究背景 研究目的 研究方法 试验结果 结 论 研究背景 国外已有人用生姜甲醇提取物体外作用于人的精液，分析生姜对雄性生殖系统的影响，结果发现生姜对人的精液参数产生了毒性作用 研究目的 体外实验证实生姜对人的精液参数产生毒性作用，体外实验所获得的结果可能与人体或动物的整体试验结果存在一定的差异，把结果外推到人体体内实验可能有一些问题，因此有必要进行整体动物实验。 初步探讨采用整体动物实验，生姜提取物对雄性生殖系统的影响，为生姜新产品的开发提供毒理学依据。 研究方法 小鼠生殖脏器系数测定 小鼠睾丸染色体畸变试验 小鼠精子畸形试验 试验方法 20g姜粉 生姜提取物 50℃水浴3h 生姜醇提物 生姜水提物 每次加200mL水 200mL乙醇 煮煎3次 过滤 浓缩 动物分组 阴性对照组（NCG） 环磷酰胺注射组（CP） 生姜水提物灌胃组（AEG） 生姜水提物灌胃和环磷酰胺注射组（AEG+CP） 生姜醇提物灌胃组（EEG） 生姜醇提物灌胃和环磷酰胺注射组（EEG+CP） 动物分组 动物处理方法 给予受试物前隔夜禁食16小时，不禁水。按照体重给予受试物，环磷酰胺0.1ml/10g体重腹腔注射，生姜提取物和生理盐水均以0.1ml/10g体重灌胃。连续处理五天 生殖脏器系数测定 计算公式： 睾丸（附睾/精囊）脏器系数（%） = ×100 小鼠睾丸染色体畸变试验 适用于检测环境有害物质对整体哺乳动物睾丸生殖细胞染色体的损伤，是目前常用的一种较好的检测外源性化合物生殖毒性的方法 。 小鼠睾丸染色体畸变试验 操作： 小鼠处死→双侧睾丸→ 磷酸盐缓冲液（1mL）→剪碎→离心管定容离心10min→KCl溶液恒温20min→离心10min →固定液10min →离心10min →固定20min →混匀→滴片→染色 小鼠精子畸形试验 优点：敏感性高、简明、快速、终点明确 精子收集： 小鼠处死→双侧附睾→ 磷酸盐缓冲生理盐水（1ml） →剪碎→再加1～2ml稀释→静止3～5分钟→精子悬液 制片： 涂片→干燥→无水甲醇固定（5分钟）→染色（2%伊红10 ～ 20分） →洗片→观察 试验结果 显微镜下观察 1 生殖脏器系数的测定 2 小鼠睾丸染色体畸变试验 3 小鼠精子畸形试验 4 显微镜下观察睾丸染色体 显微镜下观察精子 生殖脏器系数的测定 组别　 睾丸脏器系数 附睾脏器系数 精囊脏器系数 NCG 0.463±0.0495 0.245±0.056 0.659±0.226* CP 0.337±0.136 0.180±0.29 0.368±0.102 AEG 0.418±0.077 0.207±0.023 0.509±0.085 EEG 0.452±0.131 0.230±0.047 0.562±0.153* AEG+CP 0.393±0.208 0.222±0.042 0.686±0.1187* EEG+CP 0.493±0.020 0.368±0.042 0.522±0.081 * 表示与cp组比较P0.05 小鼠睾丸染色体畸变试验 组别 动物数（只） 镜检细胞数（个） 染色体畸变率（%） NCG 5 500 3.80±1.48* CP 5 500 11.0±3.54 AEG 5 500 4.40±2.80* EEG 5 500 4.20±1.30* AEG+CP 5 500 7.40±1.52* EEG+CP 5 500 7.60±2.07* * 表示与cp组比较P0.05 小鼠精子畸形试验 结论 生姜提取物 1 不能对小鼠的生殖脏器系数产生不利影响 2 不能诱发小鼠睾丸染色体畸变 3 不能诱发小鼠精子畸形 结论 生姜提取物 1 改善了环磷酰胺作用下生殖脏器系数降低的状况 2 对环磷酰胺诱发的小鼠睾丸染色体畸变具有明显的抑制作用 3 对环磷酰胺诱发的小鼠精子畸形具有明显的抑制作用 结论 1 对雄性小鼠无生殖毒性 2 对环磷酰胺诱发的生殖毒性有一定的抑制作用 * * * *