代代花总黄酮对3T3-L1细胞增殖活性影响.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2016, Vol.32, No.9 代代花总黄酮对3T3-L1细胞增殖活性的影响 郝云芳，杨丽，姜建国 （华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640） 摘要：本文研究了代代花总黄酮抑制 3T3-L1 细胞增殖及诱导其凋亡的作用。不同浓度的代代花总黄酮作用于3T3-L1 细胞24 h 之后，采用 MTT 法检测代代花总黄酮对细胞增殖的抑制作用；使用倒置显微镜观察细胞形态学的变化；Annexin V-EGFP/PI 标记检 测细胞凋亡率；PI 标记法检测了代代花总黄酮对细胞周期的影响；活性氧（ROS ）试剂盒检测细胞内ROS 水平；荧光定量PCR 检测 了凋亡相关基因的mRNA 水平表达。结果表明，高浓度（300 μg/mL 和 400 μg/mL)的代代花总黄酮可显著抑制3T3-L1 细胞增殖，细 胞的抑制率分别为 38%和 63%，且细胞形态发生了明显变化，并显著升高了细胞内ROS 浓度。细胞凋亡实验结果显示，代代花总黄 酮可诱导3T3-L1 细胞早期凋亡和晚期凋亡，100 μg/mL、200 μg/mL 和 300 μg/mL 代代花总黄酮处理组的细胞早期凋亡率分别为 4.6%、 15.7%和 22.5%；晚期凋亡率分别为 14.4%、8.3%和 32.2%。而细胞周期实验则表明，处理后3T3-L1 细胞G0/G1 期细胞数比例从 58.9% 下降到 51.4%，而相应的S 期细胞数比例呈小幅度增加，G2/M 期细胞数比例变化不明显。凋亡相关基因p21 及 p53 的mRNA 表达明 显升高及促凋亡基因 bax 与抗凋亡基因bcl-2 比例的升高使3T3-L1 进入细胞凋亡程序。 关键词：代代花总黄酮；3T3-L1 细胞；细胞凋亡；细胞周期 文章篇号：1673-9078(2016)9-35-40 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.9.006 Effects of the Total Flavonoids from Citrus aurantium on Proliferation and Apoptosis of 3T3-L1 Cells HAO Yun-fang, YANG Li, JIANG Jian-guo (College of Food and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) Abstract: The impact of the total flavonoids of Citrus aurantium (TFC) treatment on proliferation and apoptosis of 3T3-L1 cells was studied. After 3T3-L1 cells were cultured and treated with TFC in different concentrations for 24 h, the effect of TFC on cell proliferation was examined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Morphological changes of 3T3-L1 cells were observed under an inverted microscope, the cell apoptotic rate was determined by Annexin V-EGFP/P