第八章 血型和 与输血.ppt

三、 微柱凝胶试验 原理 凝胶具有分子筛效应和亲和效应，在微柱凝胶介质中红细胞抗原与相应的抗体结合，利用凝胶的空间位阻经低速离心，凝集的红细胞悬浮在凝胶的上层，而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶的底部（管底尖部）。 微柱凝胶试验原理 凝胶微柱：试管上端、柱体 过滤介质：颗粒直径26～103 nm的葡聚糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过 缓 冲 液：LISS（加或不加抗血清） 微柱凝胶试验原理 将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心后观察凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳性游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱，而到达小柱的底部，证明未发生凝集判断凝集反应阴性 凝胶卡式检测法 是微柱凝胶技术与上述所有技术相结合的产物 1986年由法国人Dr.Yves Lappierre发明。1994年获得美国FDA认证，目前在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床 三、 微柱凝胶试验 试验在透明塑料卡上的凝胶管中进行，微柱凝胶试验（又名微柱凝胶血型卡法）比传统的玻片和试管液体介质中凝集试验更准确、更敏感、更简单，结果可以长期保存。 微柱凝胶试验 微柱凝胶分中性胶、特异性胶和抗人球蛋白胶，分别用于不同的血型血清试验。在中性凝胶中不含抗体，可用于ABO血型正反定型试验。 微柱凝胶试验 在特异性凝胶中含有特异性血型抗体，可用于血型抗原检测。 在抗人球蛋白凝胶中含有球蛋白抗体，可用于检测IgG类不完全抗体和相应的红细胞抗原的反应，如交叉配血、不规则抗体检测和鉴定，以及用于人血清抗D血型筛查。 微柱凝胶试验结果判读模式 事先在凝胶微柱中的LISS缓冲液中加入AHG,实验中,将红细胞与抗血清加入凝胶上部,离心后观察。 如果抗体能结合在红细胞表面,那么通过凝胶内AHG桥联,红细胞发生凝集,判断凝集实验阳性 如果抗体未能结合在红细胞表面,那么红细胞不能凝集,判断凝集实验阴性 在凝胶上层加入酶试剂，利用木瓜酶或菠萝酶减小红细胞间阻力，促进红细胞凝集 凝胶抗人球试验—凝胶凝集试验与抗人球技术结合 二、交叉配血试验方法评价 盐水配血法 优点：反应迅速，如有不配合问题 可立即显示出来，使用方便。 缺点：只能检出完全抗体若要检测不完全抗体需采用其他配血法。 交叉配血试验方法评价 酶介质配血法 优点 易检出Rh血型抗体，操作简便， 试剂易购得，敏感性尚高。 缺点 操作较盐水配血法繁杂。 交叉配血试验方法评价 抗球蛋白介质配血法 优点：检查不完全抗体最可靠； 缺点：试剂供应少，价格较贵，操作步骤较繁杂，仅适用于某些特殊需要。 交叉配血试验方法评价 聚凝胺配血法 为最近提出的配血方法 优点：除了Kell系统部分抗体如抗K、抗Kpa、抗Kpb需用抗人球蛋白法才能检出外，其他IgM、IgG两种性质的抗体均可以检出，且无非特异性反应。 交叉配血试验方法评价 聚凝胺配血法 还可检出能引起溶血性输血反应几乎所有的规则与不规则的抗体，尤其能提高Rh系统抗原反应的强度，使其提高灵敏度；故现已在逐渐推广。 交叉配血试验方法评价 微柱凝胶配血法 优点：微柱凝胶卡式法操作简便，结果判定准确，易于掌握，具有很大的临床应用价值。 微柱凝胶卡可做血型鉴定、交叉配血及特殊介质配血试验。 Rh血型鉴定 四、抗人球蛋白法 不完全IgG类抗D抗体结合了含有相应抗原的红细胞后，因其分子量小，在盐水介质中只能与红细胞结合，使红细胞致敏，即在D红细胞包被一层IgG抗体，而不能使其连接起来发生凝集。加入经一定稀释的抗人球蛋白血清后，抗人球蛋白可与红细胞上结合的不完全抗体结合，将致敏红细胞连接，发生肉眼可见的凝集。 Rh血型鉴定 Rh血型鉴定 抗人球蛋白实验示意图 HAB抗原决定族 D抗原决定族 完全抗体 （抗A、抗B） 凝集 不完全抗体 （抗D） 不凝集 （致敏RBC） 致敏RBC 抗人球蛋白 （完全抗体） 凝集 Rh血型鉴定 对弱D型应多用几个批次的抗D血清进行检测。 本法是最早用于检查不完全抗体的方法，其直接法可检查受检者红细胞是否已被不完全抗体致敏；间接法可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。 Rh血型如果为D阴性，即Rh 阴性时，还需进一步检查什么？ 答案 如果为D阴性，即Rh 阴性时，则应进一步检查排除弱D（用弱D的检查方法）。 原因如下： 献血者 弱 D 血液 d阴性 （人） 输给 抗D 抗体 弱D （人） 接受 溶血性 输血反应 可产生 受血者 D 型 血液