临床微生物学和 与检验第三章细菌感染的病原学诊断.pptVIP

第三节 细菌的分离培养和鉴定 3．β―半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为 阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本试验 主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。 第三节 细菌的分离培养和鉴定 4．七叶苷水解试验 主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别。 5．甲基红试验 主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌。 6．V―P试验 本试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的 细菌，后者通常为阴性。 第三节 细菌的分离培养和鉴定 2．吲哚(靛基质)试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。 （二）蛋白质和氨基酸的代谢试验 1．明胶液化试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴别。 第三节 细菌的分离培养和鉴定 3．硫化氢试验 培养基：醋酸铅培养基 应用：主要用于肠杆菌 科中属及种鉴别 第三节 细菌的分离培养和鉴定 4．尿素分解试验 主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。 5．苯丙氨酸脱氨酶试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌属、普罗菲登斯菌属和摩根菌属细菌均为阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。 6．氨基酸脱羧酶试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。 第三节 细菌的分离培养和鉴定 （三）碳源和氮源利用试验 1．枸橼酸盐利用试验 用于肠杆菌科中菌属间的鉴定。 2．丙二酸盐利用试验 肠杆菌科中属间及种的鉴别。 第三节 细菌的分离培养和鉴定 （四）各种酶类试验 1．氧化酶试验 主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别。 2．过氧化氢酶试验（触酶试验） 用于革兰阳性球菌的初步分群。 第三节 细菌的分离培养和鉴定 3．硝酸盐还原试验 本试验在细菌鉴定中广泛应用。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌等假单胞菌可产生氮气；有些厌氧菌如韦荣球菌等试验也为阳性。 * * 第三章 细菌感染的病原学诊断褚云卓 本章内容 第一节 标本的采集和处理原则 第二节 细菌的形态学检查 第三节 细菌的分离培养和鉴定 第四节 细菌的非培养检测方法 第一节 标本的采集和处理原则 一、标本采集的一般原则 1．早期采集 2．无菌采集 3．根据目的菌的特性用不同的方法采集 4．采集适量标本 5．安全采集 第一节 标本的采集和处理原则 二、标本的处理 1. 对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检 2. 其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室 3. 若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存 4. 一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h ５.病人标本中可能含有大量致病菌，必须注意安全防护 ６.标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出 ７.对于烈性传染病标本运送时更要特别严格，必须按规定包装，由专人运送 ８.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送 第二节 细菌的形态学检查 3.有些病原菌通过不染色标本的动力检查可作出初步鉴定 如疑似霍乱患者，镜下观察到来回穿梭似流星状运动的细菌，制动试验阳性，可初步推断为“疑似O1群霍乱弧菌”。 第二节 细菌的形态学检查 二、染色标本 （一）常用染料 1．碱性染料：碱性复红、结晶紫、美蓝等 2．酸性染料：有伊红、刚果红等 3．复合染料（中性染料）及荧光染料：复合染料有瑞氏染料（伊红美蓝）、姬姆萨染料（伊红天青）等；荧光染料有荧光标记的抗体 第二节 细菌的形态学检查 （二）常用的染色方法 1．革兰染色（gram stain） 革兰阳性球菌 革兰阴性杆菌 第二节 细菌的形态学检查 2．抗酸染色 （acid-fast stain） 可将细菌分为两大类： 即-抗酸性细菌 -非抗酸性细菌 第二节 细菌的形态学检查 3．荧光染色 （1）荧光染色法敏感性强，效率高而且容易观察结果，在临床细菌鉴定中有很大的实用价值。 （2）主要用于结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白喉棒状杆菌及痢疾志贺菌等的检测。 第二节 细菌的形态学检查 4.鞭毛染色 可观察到菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数量，在细菌鉴定中，特别是非发酵菌的鉴定中很重要。 5.异染颗粒染色 用于白喉棒状杆菌染色。 第二节 细菌的形态学检查 6.芽胞染色： 绿色部分 为芽胞 第二节 细菌的形态学检查 7